ایجاد بانک انجماد اسپرم ماهیان استخوانی

در این بررسی ‮‭11‬ ماهی نر آزاد با متوسط طول و وزن ‮‭37/8 5/3‬ سانتیمتر و ‮‭523/3 24/7‬ گرم و ‮‭23‬ ماهی نر سفید با متوسط طول و وزن ‮‭36/1 7/1‬ سانتیمتر و ‮‭631/3 21/6‬ گرم مورد ارزیابی قرار گرفت . تمام این ماهیان در معاینه اولیه از رسیدگی جنسی مناسب برخوردار بودند. در ابتدا پس از تهیه نمونه اسپرم، کیفیت آن مورد ارزیابی قرار گرفت. در این بخش فاکتورهایی چون درصد تحرک، مدت تحرک، تراکم، اسمولالیته و ‭pH ‬اندازه گیری شد. پس از این مرحله نمونه های اسپرم ماهیان آزاد به نسبت ‮‭3 : 1‬ با محلول رقیق کننده حاوی ترکیبات( ‮‭3.0‬‭M Glucose‬، ‮‭10‬‭% Methanol‬‮‭10‬،‭% egg yolk)‬رقیق شده و با روش دستی فرآیند انجماد صورت گرفت و در نهایت اسپرم منجمد شده به ازت مایع انتقال داده شد. نمونه های اسپرم ماهیان سفید نیز به نسبت ‮‭3 : 1‬ با دو محلول رقیق کننده شامل ترکیبات (‮‭350‬ ‭mM glucose‬، ‮‭30‬ ‭mM Tris and ‬4‭% Polyethylene glycol ) ‬و (‮‭350‬ ‭mM glucose‬، ‮‭30‬ ‭mM Tris and ‬2‭% Glycerol ) ‬رقیق شد و با استفاده از دستگاه ‭Planner Kryo ‬به روش اتوماتیک منجمد و در نهایت در ازت مایع قرار داده شد. اسپرم ماهیان 1 تا 3 ماه بعد از اولین تاریخ انجماد، از انجماد خارج شده و کیفیت آن با اندازه گیری مدت و درصد تحرک مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج بررسیها نشان داد که حجم منی استحصالی در ماهیان آزاد بیشتر از ماهیان سفید بود. همچنین درصد تحرک، مدت تحرک و میزان تراکم اسپرم در منی ماهیان آزاد بیشتر از ماهیان سفید بود لیکن میزان اسمولالیته و ‭pH ‬اسپرم ماهیان آزاد کمتر از ماهیان سفید بود. در ارزیابی اسپرم منجمد شده نیز معلوم گردید، با گذشت زمان میزان درصد تحرک و مدت تحرک اسپرم هر دو گونه ماهی در مقایسه با نمونه تازه آن کاهش یافته است. همچنین درصد تحرک و مدت تحرک نیز در اسپرم ماهیان سفید از انجماد خارج شده کمتر از این فاکتورها در نمونه آزاد بود. نتایج نشان داد نمونه اسپرم ماهی سفید که به آنها اتیلن گلیگول اضافه شده بود بعد از خارج شدن از انجماد تحرک نداشته و همگی مرده بودند. در حالیکه نمونه هایی که به آنها گلیسرول اضافه شده بود، ماندگاری اسپرم کاملا در آنها حفظ شده بود و سلولهای اسپرم تحرک داشتند. با توجه به نتایج بدست آمده، به نظر می رسد تفاوتهای گونه ای امری بسیار مهم است که باید در روند فرآیند انجماد اسپرم کاملا مد نظر قرار گیرد. همچنین با توجه به نتایج، استفاده از یک پروتکل منفرد و واحد جهت موفقیت در این امر شدنی نیست زیرا واکنش سلولهای اسپرم در برابر عوامل شیمیایی که بعنوان رقیق کننده به آنها افزوده میشود متفاوت است. لذا ضروری است جهت دستیابی به اطلاعات مناسب جهت حفظ سلولهای جنسی ماهیان ارزشمند دریای خزر با استفاده از روش انجماد، مطالعات تکمیلی در خصوص خصوصیات اسپرم هر گونه، رقیق کننده های مناسب و نیز فرآیند انجماد انجام گیرد.