CIVILICA We Respect the Science
(ناشر تخصصی کنفرانسهای کشور / شماره مجوز انتشارات از وزارت فرهنگ و ارشاد اسلامی: ۸۹۷۱)

بیان فاکتور ده در رده های سلولی ‭MDCK ‬و ‭21-BHK ‬برای افزایش کارایی تکثیر ویروس آنفلوانزا پرندگان تحت تیپ ‭H9N2‬

عنوان مقاله: بیان فاکتور ده در رده های سلولی ‭MDCK ‬و ‭21-BHK ‬برای افزایش کارایی تکثیر ویروس آنفلوانزا پرندگان تحت تیپ ‭H9N2‬
شناسه ملی مقاله: R-1053897
منتشر شده در سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی در سال 1394
مشخصات نویسندگان مقاله:

شهلا شاهسوندی
محمد کاظم شاه کرمی
محمدمجید ابراهیمی
شهین مسعودی
حسن ایزدی
محمود عظیمی
اشرف محمدی
علیرضا حاتمی

خلاصه مقاله:
جداسازی ویروس در تخم مرغ یا کشت سلول، روش بسیار حساس و ارزشمند برای تشخص عفونت ویروسی است. عوامل متعددی مانند افزودن تریپسین رشد ویروس های آنفلوانزا تحت حاد در کشت های سلولی را محدود می کنند. برای تولید رده سلولی که توانایی برش و فعال کردن هماگلونینین ‭(HA) ‬ویروس های آنفلوانزا را داشته باشد، کلون ‭cDNA ‬مربوط به فاکتور ‮‭10‬ ‭(FX) ‬جدا شده از جنین جوجه در وکتور ‭pcDNA‬‮‭1.3‬ بیان شده و به هر یک از سلول های ‮‭21‬‭-BHK ‬و ‭MDCK ‬انتقال داده شد. سپس پویایی رشد ویروس آنفلوانزا H9N2 در سلول های ‭BHK-‬‮‭21‬‭/FX ‬و ‭MDCK/FX ‬با در نظر گرفتن نقش این پروتیاز سلولی در عفونت زایی ویروس، بیان ژن ماتریکس ویروس، و تعیین خواص مولکولی طی هفت پاساژ متوالی ارزیابی شد. نتایج اولیه بیان گر این است که پلاسمید ‭FX ‬پیامد پاساژهای متوالی در این سلول ها بیان شده و تغییر ریخت شناسی در سلول ها مشاهده نمی شود. این سلول ها توانایی برش ‭HA ‬ویروس H9N2 در دز عفونی کننده ‮‭0/01‬ را دارند و ورود ویروس بدون نیاز به ترپسین پشتیبانی می شود. پویایی رشد ویروس در سلول های ‭BHK-‬‮‭21‬‭/FX ‬و ‭MDCK/FX ‬با عیارسنجی ویروس ارزیابی شد. داده ها بیان گر تکثیر مناسب ویروس در این سلول ها طی پاساژهای متوالی است و میزان آن در این دو سلول تفاوت چشمگیری ندارد. آنالیز مقایسه ای توالی ژن های ویروس نشان داد که هیچ تغییری در توالی اسیدهای آمینه رخ نداده است. نتایج این پژوهش نشان دهنده کاربرد بالقوه سلول های ‭BHK-‬‮‭21‬‭/FX ‬و ‭MDCK/FX ‬برای تکثیر ویروس آنفلوانزا H9N2 با عیار بالا و مطالعات مرتبط با آن است. واژگان کلیدی: ویروس آنفلوانزا، پویایی رشد، هماگلوتینین، فاکتور ده، پروتیاز سلولی

صفحه اختصاصی مقاله و دریافت فایل کامل: https://civilica.com/doc/1053897/