بررسی روش کشت میکروسپور به منظور تولید هاپلوییدها در رز
عنوان مقاله: بررسی روش کشت میکروسپور به منظور تولید هاپلوییدها در رز
شناسه ملی مقاله: R-1059223
منتشر شده در سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی در سال 1390
شناسه ملی مقاله: R-1059223
منتشر شده در سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی در سال 1390
مشخصات نویسندگان مقاله:
مهران عنایتی شریعت پناهی
مهناز عروجلو
خلاصه مقاله:
مهران عنایتی شریعت پناهی
مهناز عروجلو
تولید گیاهان دیصهاپلویید از گیاهان تتراپلویید تجاری رز، امکان تلاقی آنها را با گونهصهای دیپلویید وحشی و همچنین استفاده از دابلدصهاپلوییدها به عنوان لاینصهای اینبرد در جهت تولید هیبریدصهای F1 را میسر میصسازد. در این تحقیق، بررسی کشت میکروسپور به منظور القای جنین زایی در رز (Rosa hybrida ) در ارقام HBB1 ، HAV1 و HMA1 انجام گردید. عوامل موثر بر درصد زنده مانی میکروسپورهای جدا شده و تشکیل ساختارهای چند سلولی شامل نوع و مدت زمان تیمار ضدعفونی میکروسپورها، محیط جداسازی (B، AB، NLN) ، pH محیط کشت (5/،2 8/،5/5 6)، محیط کشت القایی، تیمار گرسنگی همراه با سرما (4 C) در زمان های متفاوت (2 و 4 روز) ، تیمار نوع هیدرات کربن (ساکاروز، مالتوز، گلوکز) به علاوه لاکتالبومین در زمانهای متفاوت (،5 ،10 7 روز) در دمای 30 درجه سانتیگراد و تاثیر ژنوتیپصهای مختلف مورد بررسی قرار گرفتند. بهترین مرحله تکوین میکروسپورها (مرحله میانی تا انتهایی تک سلولی) با رنگ آمیزی DAPI تعیین گردید. کمترین میزان آلودگی میکروسپورها با هیپوکلرید سدیم 5/%3 به مدت 15 دقیقه مشاهده شد. بهترین محیط جداسازی، محیط B (حاوی7/54 gr/l مانیتول) بود. در تیمار pH، بیشترین درصد زنده مانی میکروسپور در 6/2= pH حاصل شد. در تیمار محیط کشت القایی بیشترین ساختارهای چند سلولی(54/%46) در محیط کشت 1)AT3)(حاوی10 gr/l لاکتالبومین) تشکیل شد. وجود لاکتالبومین(g/l10) در محیط کشت باعث افزایش تقسیمات سلولی و تشکیل ساختارهای چند سلولی شد. در تیمارهای مختلف اعمال شده، بیشترین ساختارهای چند سلولی(08/%47) در محیط کشت 1)AT3) با تیمار دمایی 30 درجه سانتیگراد به مدت 10روز در رقم HAV1، حاصل شد اما تنها به تعداد معدودی پیش جنین ختم گردید. در حالیکه در رقم HBB1 از میکروسپورهای کشت شده در محیط کشت القایی AT3 بدون اعمال تنش شدید با وجود ایجاد درصد پایین تر ساختارهای چند سلولی، بیشترین فراوانی جنین زایی کروی (میانگین 85 جنین از 3 غنچه) مشاهده شد. بدین ترتیب دستورالعمل جنین زایی میکروسپور در رز برای اولین بار شناسایی و ارایه می گردد. واژه های کلیدی : رز، کشت میکروسپور، جنین زایی، تنش
صفحه اختصاصی مقاله و دریافت فایل کامل: https://civilica.com/doc/1059223/