گزارش نهایی پروژه تحقیقاتی کاربرد نشانگرهای ریزماهواره جهت شناسایی و ثبت ارقام انگور

برای تهیه شناسنامه مولکولی و کلید شناسایی برای ‮‭12‬ رقم تجاری انگور، نمونه برگی از ‮‭79‬ درخت شامل 5 تا ‮‭10‬ کلون از هر رقم کشت شده در ایستگاهصهای تحقیقاتی ارومیه و تاکستان تهیه شد. استخراج ‭DNA ‬به روش ‭CTAB ‬انجام و کمیت و کیفیت نمونهصها با استفاده از اسپکتروفتومتر و الکتروفورز ژل آگارز ‮‭0/8‬ درصد تعیین گردید. ارزیابی مقدماتی نمونهصها براساس ‮‭47‬ جفت آغازگر انجام و در نهایت ‮‭20‬ جفت آغازگر چند شکل با الگوی نواری تکرارپذیر برای تهیه کلید شناسایی ارقام استفاده شدند. تعداد الل تکثیری در هر جایگاه از دو ‭(VVIB‬‮‭19‬ و ‭ISV‬3) تا ‮‭15‬ ‭(ISV‬4) متغیر بود. برای تعیین قدرت تمایز نشانگرها، گروهصبندی ارقام براساس دادهصهای هر نشانگر و با استفاده از تجزیه خوشه ای انجام شد. در بین نشانگرها، ‭ISV‬4 بیشترین قدرت تفکیک ارقام را داشت و توانست الگوی نواری اختصاصی برای هشت رقم خوشناو، پیکانی کاشمر، فخری، یاقوتی، شصت عروس، میش پستان، شاهرودی و ریش بابا قرمز ژنوتیپ ایجاد کند. جهت شناسایی ترکیب نشانگری متمایزکننده، گروهصبندی ارقام با استفاده ترکیبات نشانگری مختلف انجام شد که گروهصبندی با استفاده از دو نشانگر ‭ISV‬4 و ‭ISV‬3 توانست کلیه ارقام بغیر از بیدانه قرمز و سفید را از یکدیگر تفکیک نماید. مقایسه دو به دوی الگوی نواری ارقام در جایگاهصهای ریزماهواره نشان داد که رقم میشصپستان با تفاوت در ‮‭13‬ از ‮‭20‬ جایگاه با ارقام شاهرودی و فخری بیشترین الل و یا ژنوتیپ متفاوت را داشت. جفت ارقام عسگری-شاهرودی و میش پستان-ریش باباقرمز نیز در ‮‭12‬ جایگاه الگوی نشانگری متفاوت نشان دادند. ارقام بیدانه قرمز و سفید در کلیه جایگاهصهای ریزماهواره مشابه بودند و رقم ریش باباقرمز نیز با ارقام بیدانه قرمز و سفید فقط در دو نشانگر تفاوت داشت. کلمات کلیدی: انگور، بارکد، ریزماهواره، شناسنامه مولکولی