بر همکنش فرم نوترکیب تیوردوکسین ردوکتاز وابسته به NADPH (NTR ) از گیاه برنج با تیوردوکسین(Trx) از دو منشا گیاهی و باکتریایی
عنوان مقاله: بر همکنش فرم نوترکیب تیوردوکسین ردوکتاز وابسته به NADPH (NTR ) از گیاه برنج با تیوردوکسین(Trx) از دو منشا گیاهی و باکتریایی
شناسه ملی مقاله: JR_JOAGK-6-2_003
منتشر شده در شماره 2 دوره 6 فصل در سال 1393
شناسه ملی مقاله: JR_JOAGK-6-2_003
منتشر شده در شماره 2 دوره 6 فصل در سال 1393
مشخصات نویسندگان مقاله:
هدیه اسلام پناه
آذر شاه پیری
احسان شیخ الاسلام
خلاصه مقاله:
هدیه اسلام پناه
آذر شاه پیری
احسان شیخ الاسلام
حفظ تعادل شرایط اکسیداسیون- احیا (ردوکس) در سلول برای انجام متابولیسمهای مختلف سلولی و فعالیت مسیرهای انتقال پیام بسیار حیاتی است. در موجودات زنده مکانیسمهای مختلف مولکولی در حفظ این تعادل نقش دارند. سیستم تیوردوکسین وابسته بهNADPH سیستمی متشکل از تیوردوکسین ردوکتاز وابسته بهNADPH ، تیوردوکسین و NADPH میباشد که نقش مهمی در انتقال الکترون از NADPH به باندهای دیسولفیدی در بسیاری از پروتئینهای سلولی دارد و بدین ترتیب با تنظیم تبادلات تیول-دی سولفید درحفظ تعادل ردوکس سلولی دخالت دارد. در تحقیق حاضر توالی ژن کدکنندهی یکی از ایزوفرمهای NTRاز گیاه برنج که قبلا OsNTRB نامیده شده بود، در ناقل بیانی pET28a به همراه شریک الحاقی His6-tag همسانهسازی و پلاسمید نوترکیب به میزبان بیانی اشرشیا کلی ((E.coli سویه Rosetta (DE3) منتقل شد. مقدار قابل توجهی از فرم نوترکیب این پروتئین پس از القا محیط کشت باکتری با IPTG تولید و با استفاده از کروماتوگرافی جذبی خالصسازی شد. بیان هترولوگ و خالصسازی فرم نوترکیب OsNTRB امکان بررسی برهمکنش این پروتئین را با دو تیوردوکسین موجود از دو منشا مختلف گیاه جو (HvTrxh1) و باکتری اشرشیاکلی ( (EcTrxفراهم ساخت. نتایج نشان داد فرم نوترکیب OsNTRB در محیط این ویترو فعال بوده و در حضور NADPH میتواند هر دو تیوردوکسین گیاهی و باکتریایی را احیا نماید. با این حال سرعت برهمکنش آن با تیوردوکسین HvTrxh1 بسیار بالاتر از EcTrxبوده و تفاوت قابل توجهی نشان داد.
کلمات کلیدی: برنج, تیوردوکسین ردوکتاز, تیوردوکسین, پروتئین نوترکیب
صفحه اختصاصی مقاله و دریافت فایل کامل: https://civilica.com/doc/1127708/