کلونینگ و بیان ژن کدکننده آنزیم لاکاز از باکتری باسیلوس پومیلوس سویه GAZ23
عنوان مقاله: کلونینگ و بیان ژن کدکننده آنزیم لاکاز از باکتری باسیلوس پومیلوس سویه GAZ23
شناسه ملی مقاله: JR_BJM-3-9_002
منتشر شده در در سال 1393
شناسه ملی مقاله: JR_BJM-3-9_002
منتشر شده در در سال 1393
مشخصات نویسندگان مقاله:
پروین زمانی - کارشناسی ارشد میکروبیولوژی، دانشگاه تهران، ایران
محمد علی آموزگار - دانشیار میکروبیولوژی، دانشگاه تهران، ایران
خسرو خواجه - استاد بیوشیمی، دانشگاه تربیت مدرس، ایران
خلاصه مقاله:
پروین زمانی - کارشناسی ارشد میکروبیولوژی، دانشگاه تهران، ایران
محمد علی آموزگار - دانشیار میکروبیولوژی، دانشگاه تهران، ایران
خسرو خواجه - استاد بیوشیمی، دانشگاه تربیت مدرس، ایران
مقدمه: لاکازها (بنزن دیول اکسیژن اکسیدو ردوکتاز EC 1. 10. 3. 2 ) یکی از اعضا ی خانواده مالتی کوپر اکسیدازها هستند که اکسیداسیون طیف گسترده ای از ترکیبات فنولی را با استفاده از اکسیژن مولکولی کاتالیز میکنند. مواد و روش ها : ژن کدکننده آنزیم لاکاز از سویه GAZ23 بهوسیله پرایمرهای کلونینگ اختصاصی ژن تکثیرشد. محصول PCR در ناقل بیانی ( pET21a ) کلون به باکتری اشریشیاکلی سویه BL21(DE3) انتقال یافت و تحلیل توالی انجام شد. بیان آنزیم با استفاده از سوبسترای معمول لاکاز ABTS سنجیده شد. نتایج: توالی ژن S rDNA 16 سویه بومی GAZ23 که از خاکهای ایران جدا شده است دارای 100 درصد شباهت به باکتری باسیلوس پومیلوس بود. ژن لاکاز در سویه GAZ23 دارای 1533 نوکلئوتید است که 510 آمینواسید را کد میکند. بحث و نتیجه گیری: ژن لاکاز سویه GAZ23 دارای 67 درصد شباهت آمینواسیدی به پروتئین CotA باکتری باسیلوس سوبتیلیس است. به منظور به دست آوردن مقادیر بالای پروتئین محلول، بیان، تحت شرایط میکروآئروبیک و در دمای پایین انجام شد. 4 دمین غنی از هیستیدین متصل شونده به مس در توالی آمینواسیدی این پروتئین وجود دارد .
کلمات کلیدی: پروتئین CotA, لاکاز, باسیلوس پومیلوس, بیان ژن
صفحه اختصاصی مقاله و دریافت فایل کامل: https://civilica.com/doc/1145448/