بهینه سازی ترسیب توکسوئید دیفتری بهمنظور ارتقاء واکسن بهوسیله آمونیوم-سولفات فوق اشباع
Publish place: New Cellular Biotechnology - Molecular، Vol: 8، Issue: 31
Publish Year: 1397
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: Persian
View: 269
This Paper With 9 Page And PDF Format Ready To Download
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_NCMBJ-8-31_010
تاریخ نمایه سازی: 16 اسفند 1399
Abstract:
سابقه و هدف: کورینه باکتریوم دیفتریه باکتری هوازی و بیهوازی اختیاری است. مهمترین گونه از خانواده کورینه باکتریاها، عامل بیماری دیفتری است که به وسیله توکسین خود، بیماری دیفتری را ایجاد میکند. آمونیم سولفات نمکی معدنی است که از آن برای ترسیب و خالصسازی پروتئین ها استفاده میشود که با افزایش مقدار نمک حلالیت پروتئینی کم شده و پروتئین ها به واسطه قطعه های هیدروفوب خود، بههم پیوسته و رسوب میکنند. واکسن دیفتری از طریق تخلیص و ترسیب توکسوئید باکتری دیفتری تهیه می شود که از جمله روشهای ترسیب، استفاده از آمونیوم سولفات بهصورت نمک خشک و یا تهیه محلول فوق اشباع از آن است.
مواد و روش ها: کشت باکتری دیفتری در شرایط بهینه و مغذی سبب افزایش تولید توکسین توسط باکتری میشود و بعد از غیرفعال سازی توکسین و تبدیل آن به توکسوئید در صنایع تولید واکسن مورد استفاده قرار میگیرد. کلیه محیطهای کشت باید حداقل بهمدت 24 ساعت در حرارت 37-35 درجه سانتیگراد انکوبه شوند. به منظور ترسیب توکسوئید باکتری از محلول فوق اشباع 32/4 مولار آمونیوم با درصدهای مختلف سولفات استفاده شد. نتایج بهدست آمده از این روش باSDS PAGE و (Lateral flow test) Lf TEST مورد بررسی قرار گرفت.
یافتهها: استفاده از آمونیومسولفات فوق اشباع32/4 مولار به جای استفاده از نمک خشک آمونیومسولفات که در روش سنتی (WHO TRS, No.980) که قبل در صنایع واکسن سازی مورد استفاده قرار میگرفت، باعث حذف مرحله طولانی مدت دیالیز شده و از طرفی هدر رفت محصول نهایی (توکسوئید) را به صورت کامل محسوس کاهش داده و همچنین باعث حذف ناخالصی های ناخواسته از محصول نهایی شده و محصول نهایی خالص تر را در مقیاس بیشتر در اختیار قرار داده است.
نتیجه گیری: از آنجاییکه هدف در صنایع تولید واکسن، دستیابی به مقدار حداکثری توکسوئید از این باکتری است لذا استفاده از آمونیوم سولفات فوق اشباع 32/4 مولار برای ترسیب توکسوئید دیفتری به جای استفاده از نمک خشک آمونیوم سولفات باعث کاهش هدر رفت محصول نهایی و حذف مرحله زمان بر و غیر اقتصادی دیالیز شده و از نظر اقتصادی نیز مقرون به صرفه تر خواهد بود.
Keywords:
Vaccine , Diphtheria , Precipitation , Toxoid , Ammonium sulphate , واکسن , دیفتری , ترسیب , توکسوئید , آمونیومسولفات
Authors
میثم اکرمی
Department of Biology,Faculty of Science,Islamic Azad University Central Tehran Branch,Iran
مجتبی نوفلی
Razi Vaccine and Serum Research Institute, Agricultural Research, Education and Extension Organization (AREEO), Karaj, Iran
میترا السادات طباطبایی
Department of Biology,Faculty of Science,Islamic Azad University Central Tehran Branch,Iran