همسانه سازی تمام طول ژن E2 از ژنوتیپ 2a استرین JFH1 ویروس هپاتیت سی درون وکتور pET28a(+) و انتقال آن به باکتری اشریشیاکلی سویه DH5α

سابقه و هدف: پوشش گلیکوپروتئینی E2 ویروس هپاتیت سی برای ورود ویروس به سلول های میزبان مورد نیاز است، همچنین به دلیل اختلاف توالی نوکلئوتیدی در ناحیه C ترمینال ژن E2 تنوع ویروسی به وجود می آید که موجب پایداری عفونت می گردد، در نتیجه این ژن هدف اصلی برای تولید آنتی بادی های خنثی کننده و ساخت واکسن می باشد. در این تحقیق نیز جهت مطالعات مقدماتی، تمام طول ژن E2 از ژنوتیپ 2a استرین JFH1 ویروس هپاتیت سی درون وکتورpET28a(+) قرار گرفته و به درون باکتری E-coli انتقال یافته است. مواد و روش ها: ژن ناحیه E2 از ژنوتیپ2a  استرین JFH1 ویروس هپاتیت سی پس از طراحی پرایمرهای دارای جایگاه آنزیم های محدودگر EcoR1 و Nde1 توسط واکنش PCR تکثیر گردید و محصول آن پس از تائید درون وکتورpET28a(+) نوترکیب گشت، سپس به روش شوک حرارتی درون سلول باکتری E-coli سویه DH5α، ترانسفورم شده و تائید گردید. یافته ها: همسانه سازی ژن E2 به صورت تمام طول درون وکتورpET28a(+) با موفقیت انجام شد و سازه نوترکیب (pET28a – E2) به درون سلول باکتریE-coli DH5α  منتقل شده و تائید گردید. نتیجه گیری: ساخت وکتور نوترکیب pET28a(+) دارای ناحیه تمام طول ژن E2 از ژنوتیپ 2a استرین JFH1 ویروس هپاتیت سی و انتقال به درون باکتری E-coli این امکان را فراهم می کند تا جهت بیان ژن مزبور در سویه های بیانی از این وکتور نوترکیب استفاده شود.

Keywords:

Hepatitis C Virus , E2 gene full-length , genotype 2a (JFH1) , pET28a (+) vector , E-coli (DH5α). , ویروس هپاتیت سی , تمام طول ژن E2 , ژنوتیپ 2a استرین JFH1 , وکتورpET28a(+) , باکتری E- coli.