شبنم بخشعلی زاده - Department of Anatomy, Tehran university of medical science, Tehran, Iran
فریبا اسماعیلی - Department of Biology, Faculty of Basic Sciences, Shahrekord University, P.O. Box ۱۱۵, Shahrekord, Iran
هدایت الله شیرزاد - Cellular & Molecular Research Center, Shahrekord University of Medical Sciences, Shahrekord, Iran
فریبا هوشمند - Physiology Dept., Faculty of Medical Sciences, Shahrekord University of Medical Sciences, Shahrekord, Iran
مرضیه ابراهیمی هفشجانی - Department of Biology, Faculty of Basic Sciences, Shahrekord University, P.O. Box ۱۱۵, Shahrekord, Iran
ثریا قاسمی - Cellular & Molecular Research Center, Shahrekord University of Medical Sciences, Shahrekord, Iran

زمینه و هدف: سلول های P۱۹ دودمانی از سلول های کار سینومای جنینی چند استعدادی هستند که قادرند در محیط کشت حاوی سرم رشد نموده و برای تمایز به هر سه دودمان مزودرمی، آندودرمی و اکتودرمی القا شوند. با استفاده از روش های استاندارد ترانسفکشن می توان توالی DNA خارجی را به این سلول ها وارد کرده و عملکرد و تمایز سلولی را بررسی کرد. این تحقیق با هدف القای فنوتیپ عصبی در سلول های P۱۹ ترانسفکت شده با ژن پروتئین فلوئورسانت سبز (GFP) با استفاده از داروی ضد پارکینسونی دپرنیل صورت گرفت. روش بررسی: در این مطالعه توصیفی آزمایشگاهی از روش رسوب کلسیم فسفات جهت وارد کردن پلاسمید pML۸ حاوی ژن GFP و ژن مقاوم به پیورومایسین به این سلول ها استفاده شد. سلول ها با استفاده از محیط کشت MEM-A (Minimum Essential Medium Alpha) حاوی ۱۵ درصد سرم گاوی جنینی کشت داده شدند. در اینجا غلظت ۸-۱۰ مولار دپرنیل برای القای تمایز اجسام شبه جنینی به دودمان عصبی استفاده شد. جهت ارزیابی تمایز سلول های P۱۹ بررسی موفولوژی با استفاده از رنگ آمیزی اختصاصی کرزیل ویوله انجام شد. به علاوه برای ردیابی پروتئین های ویژه سلول های عصبی مانند سیناپتوفیزین و بتاتوبولین III از روش ایمنوفلورسنس استفاده شد. یافته ها: ضمن تولید سلول های P۱۹ ترانسفکت شده پایدار، تمایز عصبی این سلول ها تحت تاثیر عامل القایی دپرنیل انجام شد. نورون های GFP مثبت مشتق شده از سلول های کار سینومای جنینی نشانگرهای ویژه سلول های عصبی را بیان کردند. نتیجه گیری: سلول های تمایز یافته GFP مثبت می توانند در مطالعات پیوندی و پژوهش های پایه ای مرتبط با سلول درمانی و بیماری های تحلیل سیستم عصبی مورد استفاده قرار گیرند.

Embryonal carcinoma cells, GFP gene, Neuronal differentiation, Synaptophysin, β-III tubulin, سلول های بنیادی کار سینومای جنینی, ژن GFP, تمایز عصبی, سیناپتوفیزین, بتاتوبولین III