بررسی و مقایسه اثر میکروپارتیکل های مشتق شده از سلول های مایلومای انسانی و موشی بر روی تکثیر سلول های لنفوسیتی آلوایمن

Publish Year: 1400
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: Persian
View: 381

This Paper With 5 Page And PDF Format Ready To Download

  • Certificate
  • من نویسنده این مقاله هستم

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این Paper:

شناسه ملی سند علمی:

BCBCN04_024

تاریخ نمایه سازی: 4 شهریور 1400

Abstract:

آلو ایمنی در اثر تزریق خون ناسازگار و در معرض قرار گرفتن لنفوسیت ها با آنتی ژن بیگانه موجود بر سطح گلبول قرمز ایجاد می گردد.[۱] لنفوسیت های آلو ایمن می توانند در تولید آنتی بادی ضد آنتی ژن تحریکی به کار گرفته شوند.[۳ ,۲] به علت طول عمر کوتاه این لنفوسیت ها، بایستی نامیرا سازی در آنها اتفاق بیفتد. یکی از روش های نامیرایی، مواجهه سلول های سرطانی مایلومایی با لنفوسیت هایB جهت ایجاد سلول هیبریدوما می باشد.[۴] از طرف دیگر، میکروپارتیکل ها وزیکول های غشای پلاسمایی با قطر بین ۱۰۰ تا ۱۰۰۰ نانومتر می باشند که از سلول های طبیعی و سرطانی منشا گرفته و در بقای سلولی نقش دارند.[۵] تاثیر برخی از این میکروپارتیکل ها، خصوصا میکروپارتیکل های مشتق از سلول های خونی یا میکروپارتیکل های اندوتلیالی در افزایش تکثیر سلول های سرطانی ، همچنین تکثیر و فعال سازی لنفوسیت های B به اثبات رسیده است.[۹ -۶] با این حال مطالعه ای بر روی میکروپارتیکل های مشتق از سلول های سرطانی مایلومایی بر تکثیر و افزایش طول عمر سلول های لنفوسیتی تا کنون انجام نشده است.هدف :"در این مطالعه برای اولین بار، تاثیر میکروپارتیکل های مشتق از سلول های مایلومایی انسانی و موشی در بقا و تکثیر لنفوسیت های آلوایمن مورد مطالعه قرار گرفت.روش تحقیق:"میکروپارتیکل ها از سلول های مایلومایی انسانی ( U۲۶۶) و موشی ( ( P۳X۶۳Ag۸ با استفاده از روش اولترا سانتریفیوژ در rpm ۱۶۰۰۰ به مدت ۱۵ دقیقه جداسازی شدند. سلول های لنفوسیتی آلوایمن ضد آنتی ژن RhE از فراورده خون تازه به کمک فایکول و استفاده از سانتریفیوژ شیب گرادیان جدا گردیدند. سلول های لنفوسیتی در دو گروه تست و کنترل درچاهک های پلیت ۹۶ خانه تقسیم بندی گردیدند. پس از محاسبه غلظت میکروپارتیکل ها با روش برد فورد، چاهک های گروه تست به ۲ بخش تقسیم گردیده و پس از اضافه کردن ۲۰۰۰۰ سلول لنفوسیتی به هر چاهک، گروهی از سلول ها با میکروپارتیکل های حاصل از سلول های مایلومای انسانی و گروه دیگر با میکروپارتیکل های مربوط به سلول های مایلومای موشی در محیط کشت مواجه شدند. تمامی واکنش ها به صورت ۳تکرار تایی انجام شد. در گروه کنترل به لنفوسیت ها ، میکروپارتیکل اضافه نگردید. جدول ۱، اطلاعات مربوط به میکروپارتیکل ها و سلول های لنفوسیتی مورد استفاده در این مطالعه را نشان می دهد. در هفته های مختلف کشت به مدت ۵ هفته، اثر میکروپارتیکل ها بر میزان تکثیر سلول های لنفوسیتی با مشاهده میکروسکوپی و رنگ آمیزی تریپان بلو بررسی گردید. نتایج حاصل با استفاده از آزمون آماری paired sample T-test آنالیز و مقدارP<۰.۰۵ از نظر آماری معنی دار در نظر گرفته شد.نتیجه گیری: بررسی میکروسکوپی سلول ها با میکروسکوپ معکوس نشان داد که میکروپارتیکل ها باعث افزایش تکثیرنمونه های تست (سلول های لنفوسیتی مواجه شده با میکروپارتیکل) و ماندگاری قابل توجه آنها در محیط کشت در مقایسه با گروه کنترل (سلول های لنفوسیتی بدون مواجهه با میکروپار تیکل) گردیده اند (شکل ۱). جدول ۲ تعداد سلول های لنفوسیتی پس از دریافت میکروپارتیکل ها در هفته های مختلف نشان می دهد. میانگین تکثیر و ماندگاری در سلول های دریافت کننده میکروپارتیکل به طور معناداری بالاتر از سلول های کنترل می باشد (P< ۰.۰۵)میزان تکثیر در گروه دریافت کننده میکروپارتیکل های مایلومایی موشی بسیار بالاتر از مایلومایی انسانی بود. شکل ۲، نمودار ستونی تعدادسلول ها را در هر کدام از گروه های سلولی تحت مطالعه در مقایسه با گروه کنترل نشان می دهد. در مطالعه حاضر، میزانتکثیر سلول های لنفوسیتی پس از مواجهه با میکروپارتیکل های مشتق از سلول های سرطانی مایلومای موشی و انسانی به طرز قابل توجهی بالاتر از گروه کنترل در مدت زمان مشابه بود. در صورت تایید آزمایشات تکمیلی سرولوژی و تعیین اینکه B چه مقدار از جمعیت سلول های لنفوسیتی ، مربوط به لنفوسیت های بوده اند میکروپارتیکل های مشتق از سلول های مایلومایی می توانند به عنوان عامل کمکی جهت افزایش بقا و تکثیر سلول های لنفوسیتی آلوایمن و استفاده بعدی از آنها جهت تولید آنتی بادی مورد استفاده قرار بگیرند.

Authors

فاطمه یاری

PhD بیوتکنولوژی پزشکی استادیار مرکز تحقیقات انتقال خون موسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون تهران ایران

سعیده میلانی

PhD ایمونولوژی استاد مرکز تحقیقات انتقال خون موسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون تهران ایران