سنتز و بررسی نانو ذرات کیتوزان کلراید/پلاسمید و بررسی رهایش پلاسمید از نانو ذرات از طریق الکتروفورز و PCR

کیتوزان کلراید از مشتقات کیتوزان میباشد و مانند کیتوزان یک پلیمر زیست تخریب پذیر و فاقد اثر سمیت ا ست، از آنجا که به دلیل برهمکنش ضعیفتر با DNA، رهایش DNA از نانو ذرات کیتوزان کلرایدDNA/ با سهولت بیشتری انجام می شود، امروزه نانو ذرات کیتوزان کلرایدDNA/ بسیار مورد توجه پژوهشگران میباشند و در این پژوهش هم بررسی شده اند. پس از جذب DNA پلاسمیدی (با اندازه ۳۶۳۳ جفت باز) بر سطح نانو ذرات کیتوزان کلراید که به روش کمپلکس ساده انجام شد، اندازه و مورفولوژی نانو ذرات از طریق میکروسکوپ الکترونی روبشی (SEM) بررسی شد. برای تایید جذب پلاسمید بر سطح نانوذرات از ژل آگارز و ا شعه UV ا ستفاده شد. سپس رهایش پلا سمید از طریق تیمار با آنزیم لیزوزیم و محلول فسفات بافر سالین (PBS) برر سی گردید. جهت بررسی بیشتر رهایش، از PCR نیز استفاده شد. نتایج نشان داد که اندازه متوسط نانو ذرات کمتر از ۱۵۰ نانومتر است و مورفولوژی نانو ذرات کروی میباشد. با بررسی ژل آگارز مشخص گردید که DNA پلاسمیدی بر روی سطح نانو ذرات جذب سطحی شده است و پس از تیمار، رهایش DNA پلاسمیدی اتفاق میافتد، که نتایج از طریق PCR هم تایید گردید. از آنجا که نانو ذرات کیتوزان کلراید/پلاسمید با سهولت سنتز میگردند و علیرغم محافظت از DNA، رهایش DNA از آنها نیز به راحتی اتفاق میافتد، جهت اهداف درمانی مقرون به صرفه و مناسب هستند.

Keywords:

کمپلکس ساده , رهایش , جذب سطحی , لیزوزیم , زیست تخریب پذیر