استفاده از ژله رویال به عنوان جایگزین سرم گاوی در کشت برون تنی رویان بز با تاکید بر بیان ژن های درگیر در مرگ سلولی

پژوهش حاضر به منظور بررسی استفاده از غلظت­ های متفاوت ژله ­رویال به ­عنوان جایگزین سرم در کشت برون­ تنی رویان بز با تاکید بر بیان ژن­های درگیر در مرگ سلولی انجام شد. بلوغ برون­ تنی اووسایت در معرض غلظت ­های ۱۰ درصد FBS (محیط پایه)، ۱۰ میلی­ گرم بر میلی­ لیتر ژله رویال (بدون سرم)، ۵ درصد FBS + ۵ میلی­ گرم بر میلی­ لیتر ژله رویال، ۵/۲ درصد FBS + ۵/۷ میلی­ گرم بر میلی­ لیتر ژله رویال و ۵/۷ درصد FBS + ۵/۲ میلی­ گرم بر میلی­ لیتر ژله رویال انجام شد. پس از ۲۴ ساعت، اووسایت­ ها به مرحله متافاز میوز  II (اووسایت بالغ) رسیدند و بیان نسبی ژن­های مورد نظر در اووسایت نیز اندازه ­گیری شد. اووسایت های بالغ به صورت لقاح برون ­تنی و توسط اسپرم های بارور تلقیح و نرخ کلیواژ و نرخ بلاستوسیست نیز اندازه ­گیری شد. نتایج ما نشان داد که درصد بلوغ برون­ تنی، درصد کلیواژ و رویان برون­تنی با افزایش تدریجی غلظت ژله رویال به ­طور معنی داری از تیمار شاهد بیشتر شد (۰۵/۰ P <)، به­ صورتی­که تیمار دارای ۱۰ میلی­ گرم بر میلی ­لیتر ژله رویال، بیشترین درصد بلوغ برون­تنی اووسایت بز( ۳۵/۹۱ درصد)، بیشترین درصد کلیواژ (۳۹/۸۳ درصد)، و بیشترین درصد بلاستوسیست (۱۸/۳۰ درصد) را نسبت به گروه شاهد (۳۱/۷۱، ۵۰/۶۲ و ۴۲/۲۱ درصد؛ به ­ترتیب) دارا بود. افزایش غلظت ژله رویال و جایگزینی آن به‎جای FBS بیان نسبی ژن BCL۲ را افزایش داد (۰۵/۰ p <) در حالیکه منجربه کاهش معنی­ داری بیان نسبی ژن BAX شد. نسبت BCL۲/BAX نیز افزایش معنی داری (۰۵/۰ p <) متناسب با افزایش غلظت ژله رویال داشت. تفاوت معنی ­داری بین تیمار ها در بیان نسبی ژن CASPASE۳ دیده نشد. بر اساس یافته­ های این پژوهش می ­توان نتیجه گرفت که افزایش غلظت ژل رویال به جای سرم جنین گاو در محیط بلوغ برون تنی اووسایت توانست شرایط تکامل و تولید رویان برون تنی بز را بهبود دهد.

Keywords:

Caprine Oocyte , Fetal Bovine Serum , In Vitro Embryo Production , Royal Jelly , ژله رویال , سرم جنین گاوی , اووسایت بز , کشت برون تنی رویان