همسانه سازی، بیش بیان و بررسی خصوصیات آنزیم قلیایی فیتاز (phyC) در باکتری اشرشیا کلی

Publish Year: 1392
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: Persian
View: 274

This Paper With 16 Page And PDF Format Ready To Download

  • Certificate
  • من نویسنده این مقاله هستم

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این Paper:

شناسه ملی سند علمی:

JR_JOAGK-5-2_001

تاریخ نمایه سازی: 12 مهر 1400

Abstract:

فیتاز (مایواینوزیتول هگزا کیس فسفات فسفو هیدرولاز) آنزیمی هیدرولیزی است که فسفات معدنی تولید می کند. ژن کد کننده فیتاز phyC از باکتری باسیلوس سابتیلیس ATCC۱۲۷۱۱ جداسازی و توالی یابی شد. توالی نوکلوتیدی ژن فیتاز حاوی ناحیه کدکننده به طول ۱۰۸۹ جفت باز است که ۹۰ نوکلوتید ابتدایی آن، مربوط به سیگنال پپتید ژن می باشد. به منظور تولید آنزیم فیتاز نوترکیب، ژن هدف به وکتور بیانی pET۳۲a (+) وارد شد و وکتور نوترکیب پس از تکثیر در باکتری اشرشیا کلی DH۵α به باکتری اشرشیا کلی BL۲۱(DE۳) به عنوان میزبان بیان منتقل شد. تحریک بیان ژن با استفاده از IPTG در غلظت نهایی ۱ میلی مولار در دمای ۳۰ درجه سانتی­گراد و حضور کلرید کلسیم ۱۰ میلی­مولار صورت گرفت. نمونه گیری در زمان های صفر تا پنج ساعت انجام شد و میزان تولید پروتئین نوترکیب با استفاده از الکتروفورز بررسی گردید. فیتاز محلول حاصل از ژن phyC-Trx با موفقیت به شکل درون سلولی در باکتری اشرشیا کلی بیان شد. وزن مولکولی فیتاز نوترکیب تولید شده در حدود ۶۴ کیلو دالتون تخمین زده شد. اندازه­گیری فعالیت آنزیمی با استفاده از روش استاندارد فسفاتاز، فعالیت آنزیم نوترکیب تولید شده را ۴۴/۷ واحد در میلی لیتر نشان داد. همچنین pH بهینه برای فعالیت آنزیم فیتاز قلیایی نوترکیب در حدود ۷ برآورد شد. نتایج نشان داد که فیتاز بدست آمده از باکتری باسیلوس سابتیلیس به جهت پایداری حرارتی و همچنین هزینه پایین تولیدی گزینه مطلوبی جهت استفاده در صنعت می باشد.

مراجع و منابع این Paper:

لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این Paper را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود Paper لینک شده اند :
  • Ariannejad H, Nassiri M R, Aslaminejad A, Tahmoorespour M, Valizadeh ...
  • Bae H D, Yanke L J, Cheng KJ, Selinger LB ...
  • Cheryan M (۱۹۸۰). Phytic acid interaction in food systems. CRC ...
  • Choi Y M, Suh HJ, Kim JM (۲۰۰۱). Purification and ...
  • Dvorakova J, Volfova O, Kopecky J (۱۹۹۷). Characterization of phytase ...
  • Farhat A, Chouayekh H, Farhat MB, Bouchaala K, Bejar S ...
  • Gibson DM, Ullah AHJ (۱۹۸۸). Purification and characterization of phytase ...
  • Greiner R, Konietzny U, Jany KD (۱۹۹۳). Purification and characterization ...
  • Gulati HK, Chadha BS, Saini HS (۲۰۰۷). Production and character ...
  • Hara A, Ebina S, Kondo A, Funagua T (۱۹۸۵) A ...
  • Harland BF, Morris ER (۱۹۹۵) Phytate: A good or a ...
  • Kerovuo J, Lauraeus M, Nurminen P, Kalkkinen N, Apajalahti J ...
  • Lavallie E R, Diblasio EA, Kovacic S, Grant KL, Schendel ...
  • Liu QQ, Li QF, Jiang L, Zhang DJ, Wang HM, ...
  • Nasi M (۱۹۹۰). Microbial phytase supplementation for improving availability of ...
  • Oh BC, Choi WC, Park S, Kim YO, Oh TK ...
  • Olazaran MG, Blanco LR, Trevin JGC, Lopez JAG, Salvado JMV ...
  • Pasamontes L, Haiker M, Henriquez-Huecas M, Mitchell DB,van Loon APGP ...
  • Powar VK, Jagannathan V (۱۹۸۲). Purification and properties of phytate-specific ...
  • Reddy NR, Pierson MD, Sathe SK, Salunkhe DK (۱۹۸۹). Phytates ...
  • Sambrook J, Russell DW (۲۰۰۱). Molecular cloning: a laboratory manual,۳rd ...
  • Sambrook J, Fritsch EF, Maniatis T (۱۹۸۹). Molecular cloning: a ...
  • Scott JJ, Loewus FA (۱۹۸۶). A calcium-activated phytase from pollen ...
  • Shimizu M (۱۹۹۲). Purification and characterization of phytase from Bacillus ...
  • Tran TT, Mamo G, Mattiasson B, Hatti-Kaul R (۲۰۱۰). A ...
  • Tye AJ, Siu FK, Leung TY, Lim BL (۲۰۰۲). Molecular ...
  • Van der Klis JD, Versteegh HA, Simons PC, Kies AK ...
  • Wyss M, Brugger R, Kronenberger A, Remy R, Fimbel R, ...
  • Yamabhai M, Buranabanyat B, Jaruseranee N, Songsiriritthigul C (۲۰۱۱). Efficient ...
  • نمایش کامل مراجع