همسانه سازی و بررسی بیان موقت پیشبر pat۱ گیاه سیب زمینی با استفاده از سیستم اگرواینفیلتریشن
Publish place: Journal of Crop Breeding، Vol: 4، Issue: 9
Publish Year: 1391
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: Persian
View: 92
This Paper With 15 Page And PDF Format Ready To Download
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_JCB-4-9_008
تاریخ نمایه سازی: 17 مهر 1400
Abstract:
پیشبرها یکی از عناصر کلیدی مهندسی ژنتیک برای هدفمندی بیان ژنها محسوب میشوند. به منظور بیان اختصاصی ژن در غدههای سیبزمینی عمومیترین پیشبر مورد استفاده پیشبر Patatin است. پاتاتین گروهی از گلیکوپروتئینها هستند که به وسیله یک خانواده چندژنی رمزسازی میشوند. این پروتئینها بیش از ۴۰% پروتئینهای محلول در غده سیبزمینی را به خود اختصاص میدهند. پیشبرهای کلاس I به طور عمده مسئول بیان پاتاتینهای غده بوده و بنابراین الگوی بیان اختصاصی برای غده داشته و در بخش بافت پارانشیمی آن به مقدار زیاد وجود دارند. هدف از این تحقیق همسانهسازی پیشبر اختصاصی غده سیبزمینی ( پاتاتین کلاس I ( pat۱ )) و بررسی بیان اختصاصی آن میباشد. پس از استخراج DNA ژنومی از گیاه سیبزمینی، پیشبر Pat۱ با استفاده از پرایمرهای اختصاصی همسانهسازی شد. قطعه مورد نظر با دو آنزیم برشی Bam HI و Hind III جدا و خالصسازی شده و جایگزین پیشبر دایمی CaMV۳۵S در ناقل دوگانه pBI۱۲۱ گردید. پلاسمید نوترکیب به روش شوک حرارتی به Agrobacterium tumefaciens سویه LBA۴۴۰۴ منتقل گردید. با استفاده از روش اگرواینفیلتریشن بیان اختصاصی ژن gus در بافتهای گیاه سیبزمینی مورد بررسی قرار گرفت. نتایج حاصل نشان داد که در مقایسه با پیشبر CaMV۳۵S ، پیشبر PatI نیز با کارایی بالایی باعث بیان ژن gus در غدهها میشود.
Keywords:
Authors