ارزیابی کارایی پروتئین A۶۰ باکتری مایکوباکتریوم بوویس سویه BCG به عنوان پادگن تشخیصی

     بیماری سل یکی از شایع­ترین بیماری­های عفونی است. روش­های رایج تشخیص سل یا زمان گیر است یا از حساسیت و ویژگی کافی برخوردار نمی­باشند. پادگن­های مختلف مایکوباکتریایی در واکنش با سامانه ایمنی میزبان دخیل هستند و می­توان از آنها برای تشخیص بیماری سل بهره جست. پادگن ۶۰، درشت مولکول و مقاوم به حرارت است که در مایکوباکتریوم بویس و مایکوباکتریوم توبرکلوزیس وجود دارد. این پادگن در طراحی سیستم­های الایزا برای تشخیص بیماری سل استفاده می­شود. هدف از این مطالعه خالص­سازی پادگن ۶۰ از سیتوپلاسم باکتری و ارزیابی و مقایسه کارایی آن با توبرکولین انسانی و استاندارد است. با کروماتوگرافی ژل فیلتراسیون، پادگن ۶۰ از دیگر اجزاء باکتری خالص گردید و در آگار ژل با استفاده از Anti A۶۰، Anti BCG، ایمنودیفیوژن و باند رسوبی، تشخیص داده شد. وزن مولکولی اجزاء پادگن ۶۰ با الکتروفورز بدست آمد. با انجام کروماتوگرافی، هفت فراکسیون حاصل شد. در بررسی بلات نقطه­ای، مشخص گردید که سیتوپلاسم و دیواره سلولی دارای پادگن ۶۰ می­باشند. این تست نشان داد که فراکسیون یک، بیشترین شدت رنگی را ایجاد  و در نتیجه بالاترین مقدار پادگن ۶۰ در این فراکسیون بود. در آگار ژل ایمنودیفیوژن نمونه سیتوپلاسم و همه فراکسیون­های حاصل از کروماتوگرافی با Anti BCG واکنش مثبت نشان دادند و فراکسیون یک، بیشترین میزان رسوب را در بین هفت فراکسیون دیگر ایجاد نمود. وزن مولکولی اجزای پادگن ۶۰ در محدوده ۳۵، ۳۸،۴۰ و ۶۵ کیلو دالتون تشخیص داده شد. نتایج واکنش­های حاصل از تزریق پادگن ۶۰ و توبرکولین انسانی استاندارد بیانگر تاثیر گذاری مناسب این پادگن در قیاس با توبرکولین انسانی استاندارد بود. جستجوی پادتن در سرم بیماران روشی سریع و قابل تکرار است که با حساسیت ۸۹% و اختصاصیت ۹۴% می­تواند ماده مناسبی برای تشخیص سل باشد. با این روش می­توان بدون مواد یا تجهیزات پیشرفته و گران قیمت، نتایج را به سرعت فراهم کرد.  

Keywords:

Antigen ۶۰ , Chromatography , Mycobacterium bovis , Mycobacterium tuberculosis , پادگن ۶۰ , مایکوباکتریوم بویس , مایکوباکتریوم توبرکلوزیس , کروماتوگرافی