بررسی فولیکول های آنترال تخمدانی برای تعیین غلظت اسید آلفا- لینولنیک موثر بر توانایی تکوین برون تنی اووسایت های بز

  اسیدهای چرب غیراشباع با چند باند دوگانه فزون بر نقش انرژی­زایی با تاثیر بر بافت ­ های تولید­مثلی از جمله اثر بر فولیکول ­ های تخمدان و جسم زرد و همین­طور مهیا نمودن پیش­ساز ­ های سنتز ترکیباتی نظیر استروئید­ها و پروستاگلاندین­ها بر تولید­مثل موثر هستند. در این مطالعه اسید آلفا-لینولنیک ( آلفالین ) به محیط کشت بلوغ برون تنی اووسایت­های بز افزوده شد تا اثر آن بر توانایی تکوین آنها بررسی شود. لذا، ابتدا مایع فولیکولی از فولیکول­های کوچک و بزرگ تخمدان­های بز جمع­آوری شد تا مقدار آلفالین آنها به روش کروماتوگرافی گازی اندازه گیری شود. نتایج این آزمایش اولیه نشان داد که غلظت آلفالین از فولیکول­های کوچک (۶/۶۴ میکرو­مولار) به فولیکول­های بزرگ (۶/۱۰۰ میکرو­مولار) افزایش یافت (۰۵/۰ ˂ P ). سپس با توجه به غلظت آلفالین در مایع فولیکولی فولیکول­های کوچک و بزرگ ، اووسایت­ ها در حضور غلظت های صفر (شاهد)، ۱۰ (آلفالین-۱۰)، ۵۰ (آلفالین-۵۰)، ۱۰۰ (آلفالین-۱۰۰) و ۲۰۰ (آلفالین-۲۰۰) میکرومولار کشت داده شدند. ۲۴ ساعت پس از بلوغ برون تنی، گسترش سلول­های کومولوس اووسایت ها و راندمان رسیدن آنها به مرحله­ی متافاز میوز-۲ بررسی شد. در ادامه اووسایت­های تیماری از آلفالین که بیشترین بلوغ برون تنی را نشان داد به روش پارتنوژنز فعال شدند و درصد تسهیم و تولید بلاستوسیست آنها با گروه شاهد مقایسه شد. داده­ها در هر مرحله ثبت و به روش آزمون­ مقایسه­ی میانگین­ها و یا کای دو با استفاده از نرم­افزار SAS آنالیز شدند. افزودن آلفالین به محیط کشت بلوغ برون­تنی اووسایت­ها اثری بر گسترش سلول­های کومولوس نداشت (۰۵/۰˃ P ) و تنها در بیشترین غلظت (آلفالین-۲۰۰) مقدار گسترش سلول­های کومولوس را کاهش داد (۰۵/۰ ˂ P ). درصد بلوغ برون تنی اووسایت­ها در گروه آلفالین-۵۰ افزایش معنی­داری (۰۵/۰ ˂ P ) را در مقایسه با گروه شاهد نشان داد (۱/۶۸% در مقابل ۲/۵۷%). افزودن ۵۰ میکرومولار آلفالین به محیط کشت بلوغ برون تنی اووسایت­ها همچنین درصد تسهیم (۲/۶۵ %) و تولید بلاستوسیست (۱/۲۵%) را در مقایسه با گروه شاهد بهبود بخشید (به ترتیب ۸/۵۲% و ۷/۱۶%، ۰۵/۰ ˂ P ). به طور کلی، نتایج این مطالعه­ی نشان داد که افزودن غلظت مناسب آلفالین به محیط کشت بلوغ برون تنی می­تواند راندمان بلوغ، درصد تسهیم و تولید بلاستوسیست را در اووسایت­های بز افزایش دهد.

Keywords:

Alfa-Linolenic Acid , Blastocyst , Follicular Fluid , In Vitro Maturation , Oocyte , اسید آلفا-لینولنیک , اووسایت , بلاستوسیست , بلوغ برون تنی , مایع فولیکولی