مطالعه اثر ضدسرطانی عصاره اتانولی جلبک سبزDunaliella salina جدا شده از دریاچه حوض سلطان بر رده سلولی Squamous cell carcinoma در شرایط آزمایشگاهی

استفاده از گیاهان آبزی به واسطه داشتن ترکیب های مختلف در پیشگیری و درمان بیماریها از حدود ۳۰۰۰ سال پیش در چین رایج بوده است. جلبک سبز دونالیلا (Dunaliella salina) نیز یکی از میکروجلبک های اکوسیستم های دریایی است که به واسطه داشتن ترکیب هایی نظیر کاروتنوئیدها مخصوصا بتا-کاروتن، رتینال، آپوکاروتنوئیدها، کتون ها، آلدهیدها و اپوکسیدها که با ساختار شیمیایی خاص و روشهای بیوشیمیایی می توانند اکسیژن تکی را دفع کنند و جاذب رادیکال ها باشند. در مطالعات زیادی خاصیت ضدسرطانی و ضداکسیدانی این ترکیب ها ثابت شده است. در این مطالعه از سلول های سرطان پوست استفاده شد. ویژگی بارز این نوع سرطان پوست وجود سلول های گسترش یافته پهن و فلس مانند است. هدف از این مطالعه بررسی اثر کشندگی عصاره اتانولی جلبک دونالیلا جدا شده از دریاچه حوض سلطان بر روی میزان مرگ و میر رده سلولی سرطان پوست با استفاده از نمک تترازولیوم در شرایط آزمایشگاهی بود. برای این منظور دونالیلا سالینا از دریاچه حوض سلطان در شمال شرقی قم برداشت، شناسایی و خالص سازی گردید. جلبک در محیط کشت جانسون کشت داده شد. توده جلبکی پس از برداشت و شستشو با بافر نمکی فسفات (Phosphate Buffered Salts (PBS)) در برودت خشک و برای تهیه عصاره اتانولی آماده شد. رده سلولی A۴۳۱ از انستیتو پاستور تهیه و در محیط کشت RPMI (Royal Park Memorial Institute) حاوی سرم جنینی گاوی۱۰% کشت داده شد. سلول ها در حضور غلظت های مختلف ۰، ۲۵/۶، ۵/۱۲، ۲۵، ۵۰، ۱۰۰ میکروگرم در میلی لیتر از عصاره در فواصل زمانی ۶، ۲۴، ۴۸ ساعت در انکوباتور با دی اکسیدکربن ۵% قرار داده شد. نتایج آماری داده ها نشان داد که بین غلظت های مختلف عصاره در زمان های ۲۴ و ۴۸ ساعت از نظر مرگ و میر سلول های سرطانی اختلاف معنی داری وجود دارد (۰۵/۰P<)، ولی در زمان ۶ ساعت سطح معنی داری مشاهده نشد (۰۵/۰P<). LC۵۰ عصاره در غلظت های مختلف بر روی رده سلولی سرطان پوست در فواصل زمانی گرمخانه گذاری ۶، ۲۴، ۴۸ ساعت ارزیابی شد. نتیجه LC۵۰ پس از گذشت زمان ۴۸ ساعت ۶/۴۶ میکروگرم در میلی لیتر بدست آمد. عصاره اتانولی جلبک دونالیلا جهت سنجش میزان بتا-کاروتن موجود در آن توسط HPLC آنالیز شد. نتایج بدست آمده از این مطالعه، اثر کشندگی عصاره اتانولی جلبک دونالیلا سالینا را بر روی رده سلولی A۴۳۱ نشان می دهد. به طوری که با افزایش غلظت عصاره و افزایش انکوباسیون مرگ و میر سلول های سرطان پوست نیز افزایش می یابد. پس دونالیلا می تواند به عنوان یک عامل شیمیایی و جلوگیرنده قوی رشد برای این رده سلولی مطرح باشد.

Keywords:

Dunaliella salina , LC۵۰ , HPLC , A۴۳۱