مقایسه چهار کیت استخراج RNA تجاری به منظور تشخیص ویروس ویرمی بهاره کپور معمولی (Spring Viraemia of Carp Virus)SVCV
Publish place: Iranian Scientific Fisheries Journal، Vol: 22، Issue: 4
Publish Year: 1392
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: Persian
View: 221
This Paper With 10 Page And PDF Format Ready To Download
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_ISFJ-22-4_006
تاریخ نمایه سازی: 24 آبان 1400
Abstract:
ویرمی بهاره کپور (SVC)، توسط ویروسی باRNA تک رشته ای منفی از خانواده رابدوویریده ایجاد می شود. ویروس SVCV عامل اصلی بیماری مسری ویرمی بهاره کپور در سرتاسر جهان بخصوص در ماهی کپور معمولی پراکنده است و در دیگر خانواده های ماهیان شامل اردک ماهیان ، کپور ماهیان دندانه دار ، خورشید ماهیان ، گربه ماهیان و آزاد ماهیان نیز سبب بیماری می گردد.
در این مطالعه به منظور دستیابی به روشی مناسب برای استخراج RNA ویروسSVCV ، کارایی چهار کیت مختلف برای استخراج RNA از سویه ۷۰/۵۶ SVCV تکثیر یافته در کشت سلولی، مورد مقایسه قرار گرفتند. دو کیت بر اساس استفاده از روش ماده گوانیدین تیوسانات و فنل – کلروفرم (RNA Extraction IQ۲۰۰۰ ساخت تایوان و RNX-PLUS ساخت سیناژن، ایران) و دو کیت بر اساس روش ستونی ( تجاری Cinnapure (ساخت سیناژن، ایران) وHigh Pure RNA Isolation Kit (Roche، آلمان) جهت جداسازی RNA مورد استفاده قرار گرفتند. نتایج نشان داد که میزان غلظت RNA استخراج شده با کیت های Roche و Cinapure ( به ترتیب ۷۶/۳۱ و ۲۱/۱۶ میکروگرم بر میکرولیتر ) بیشتر از دو روش فنل – کلروفرم بوده است . همچنین بجز کیت IQ۲۰۰۰ kit دیگر کیت ها در RT-PCR باند bp۴۸۰ بر روی ژل الکتروفورز را نشان دادند . همچنینRNA استخراج شده در روش کیت تجاریIQ۲۰۰۰ kit دارای غلظت کمتری بود . در نهایت در این تحقیق استخراجRNA با روش ستونی به مراتب از نظر خلوص و غلظت بهتر از روش های فنل – کلروفرم مشاهده گردید.
Keywords: