بررسی ویژگی های سنتیکی و بیوشیمیایی آلفا آمیلاز و آلفا گلوکوزیداز استخراج شده از حلزون قهوه ای

حلزون قهوه ای مرکبات ( ( Caucasotachea lencoranea از آفات مرکبات در شهرهای شمالی ایران به شمار می رود. از این گونه حلزون به منظور بررسی برخی از خصوصیات سنتیکی آنزیم های آلفا گلوکوزیداز و آلفاآمیلاز استفاده شد. هردو آنزیم پس از هموژنیزاسیون و سانتریفیوژ از غدد گوارشی حلزون قهوه ای مرکبات استخراج شده و مورد بررسی قرار گرفتند. که مقدار فعالیت آلفا آمیلاز و آلفا گلوکوزیداز در عصاره استخراج شده به ترتیب ۰/۲۷۸ و ۰/۴واحد آنزیمی بر میلی لیتر بدست آمد، بررسی پارامتر های بیوشیمیایی بر روی این دو آنزیم نشان داد که بهینه فعالیت آنزیم آلفا آمیلاز استخراج شده در pH های ۴ تا ۵ و آلفا گلوکوزیداز در ۲ pH می باشد. در بررسی پایداری این دو آنزیم، فعالیت آنها در بازه دمایی ۴ تا ۳۵ درجه سانتی گراد اندازه گیری شد. پایداری آلفا آمیلاز و آلفا گلوکوزیداز به ترتیب در pH های ۴ تا ۵ و ۲ تا ۴ بود. همچنین دمای بهینه برای آلفا آمیلاز و آلفا گلوکوزیداز در دمای ۴۰ درجه سانتی گراد مشخص گردید. بررسی فعالیت آلفاآمیلاز در محلول یون های فلزی نشان داد که باافزایش غلظت یون های CaCl۲، KCl و MgCl۲ فعالیت روند افزایشی داشته در حالی که افزایش غلظت در FeCl۲ باعث کاهش فعالیت و برای یون NaCl بر فعالیت آنزیم بی تاثیر بود. در تمامی محلولهای MgCl۲ و CaCl۲ و FeCl۲ و KCl و NaCl با افزایش غلظت، افزایش فعالیت آلفاگلوکوزیداز اندازه گیری شد. میزان پروتئین موجود در عصاره آنزیمی استخراج شده ۰/۲ میلی گرم در میلی لیتر به دست آمد. همچنین مقادیر Km و Vmax برای آلفا آمیلاز به ترتیب ۰/۱۳ میلی گرم در میلی لیتر و ۰/۰۶۲ میلی گرم در میلی لیتر بر دقیقه و برای آلفا گلوکوزیداز به ترتیب ۱/۵ میلی مولار و ۰/۰۲۸ میلی مولار بر دقیقه بدست آورده شد.

Keywords:

Caucasotachea lencoranea , آلفا آمیلاز , آلفا گلوکوزیداز , سنتیک آنزیم , استخراج آنزیم