شناسایی و بررسی جهش های ژن norA توسط توالی یابی نوکلئوتیدی در استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به سیپروفلوکساسین در شهرستان سنندج

مقدمه: فلوروکوینولون ها از جمله آنتی­ بیوتیک های مفید در مقابل عفونت­ های ناشی از باکتری استافیلوکوکوس اورئوس می باشند اما امروزه ایجاد مقاومت نسبت به این دسته از آنتی بیوتیک ها یکی از مشکلات جدی در روند درمان بیماران به شمار می ­رود. از جمله مکانیسم های ایجاد مقاومت فلوروکوینولونی در این باکتری ها بیان بیش از حد ژن norA می باشد که در این مطالعه بررسی شده است. مواد و روش ­ها: در این مطالعه تعداد ۵۰ سویه استافیلوکوکوس اورئوس از بیماران مبتلا به عفونت بینی در شهرستان سنندج جدا گردید و با استفاده از آزمایشات بیوشیمیایی مرسوم تعیین هویت شدند، آزمایش دیسک دیفیوژن برای بررسی مقاومت آنتی ­بیوتیکی و آزمایش PCR برای بررسی ژن norA انجام گرفت، سپس محصولات آزمایش PCR برای آزمایش توالی یابی DNA به شرکت Bioneer ارسال شدند. بر اساس نتایج توالی یابی و  ترجمه گر Expasy جهش های نوکلئوتیدی و آمینواسیدی بررسی شد. یافته های پژوهش: نتایج آزمایشات بیوشیمیایی به صورت کواگولاز، تخمیر قند مانیتول، DNase و همولیز مثبت، حساس به نووبیوسین و مقاوم به پلی ­میکسین بودند. مقاومت به آنتی­ بیوتیک های استفاده شده به صورت اکساسیلین(۴۲ درصد)، اریترومایسین(۴۶ درصد)، داکسی سیلین(۱۰ درصد)، آمیکاسین(۲۰ درصد)، تتراسایکلین(۲۴ درصد)، پنی سیلین(۶۸ درصد)، سیپروفلوکساسین(۱۰ درصد)، ونکومایسین(۶ درصد) و نالیدیکسیک اسید(۷۰ درصد) بود. همه سویه های مقاوم دارای ژن norA بودند و با بررسی توالی DNA، ۴ جهش نقطه­ ای نوکلئوتیدی یکسان، به ترتیبG۴۹۱-> A ، C۵۳۷-> T، A۵۸۵-> G و C۵۹۳-> T شناسایی و پس از ترجمه در جایگاه ۳۱۵ آمینواسید آسپارتیک اسید(D) به گلایسین(G) تبدیل شده بود. بحث و نتیجه گیری: در ۴ سویه استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به سیپروفلوکساسین جهش نوکلئوتیدی و آمینواسیدی مشترک مشاهده شد لذا لازم است مطالعات بیشتر انجام شود که آیا جهش ­های ذکر شده قطعا عامل افزایش بیان این ژن هستند یا خیر.  

Keywords:

staphylococcus aureus , disk diffusion , blast , expasy , sequencing , استافیلوکوکوس اورئوس , دیسک دیفیوژن , بلاست , Expasy , توالی یابی