بهینه سازی پارامترهای موثر بر Cut-offسامانه تشخیص سریع مورفین بر پایه روشLateral Flow Assay (LFA)

مقدمه: Lateral Flow Assayیک تست تشخیص سریع اعتیاد است که کاربرد فراوانی در زمینه شناسایی افراد معتاد دارد. اما مسئله سطح تشخیص این سیستم همواره به عنوان محدودیتی برای آن مطرح بوده است. مطالعه حاضر به بررسی چگونگی بهبود این پارامتر و حساسیت سامانه می پردازد. مواد و روش ها: pH کانژوگاسیون، OD ماده کانژوگه و غلظتBSA - مورفین در باند تست بر سطح تشخیص این سامانه موثرند. جهت تعیین pH بهینه از کیت«Gold in a box» استفاده شد. با اعمال محلول مورفین در غلظت های مختلف، ابتدا با فرض یک غلظت ثابت برای BSA - مورفین، OD بهینه تعیین شد و سپس با ثابت گرفتن مقدار OD، غلظت بهینهBSA - مورفین به دست آمد. در ادامه تاثیر دو فاکتور بلوکه نمودن لایه کانژوگه و افزودن قند به ماده کانژوگه نیز بررسی شد. یافته های پژوهش: ۴/۸=pH و ۱=OD به عنوان pH و ODبهینه تعیین شد. غلظت بهینهBSA - مورفین در باند تست نیز mg/ml ۵/۰ به دست آمد. با اعمال شرایط بهینه، سطح تشخیص سامانه به ng/ml۲۵ رسید و از مقایسه نتایج حاصل از کیت های بهینه سازی شده با یک نوع کیت استاندارد، حساسیت و اختصاصیت نتایج برابر ۱۰۰ و ۹۹ درصد برآورد شد. بحث و نتیجه گیری: یافتن فاکتورهای اثرگذار بر عملکرد روش تشخیصی لترال فلو و بهینه سازی آن ها می تواند راهکاری موثر جهت افزایش حساسیت و کاهش سطح تشخیص این سامانه باشد.

Keywords:

Morphine detection , OD Of co-njugated material , pH of conjugation , LFA system , optimization , تشخیص مورفین , OD ماده کانژوگه , pH کانژوگاسیون , سامانه LFA , بهینه سازی