جداسازی و کلونینگ ژن انسانی MAGEA۴ در پلاسمید بیانی pRUF

Publish Year: 1394
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: Persian
View: 249

This Paper With 6 Page And PDF Format Ready To Download

  • Certificate
  • من نویسنده این مقاله هستم

این Paper در بخشهای موضوعی زیر دسته بندی شده است:

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این Paper:

شناسه ملی سند علمی:

JR_NCMBJ-5-19_014

تاریخ نمایه سازی: 16 آذر 1400

Abstract:

سابقه و هدف: کنسر تستیس آنتی ژن ها دست های از آنتی ژن ها می باشند که به طور ویژه بیان آن ها در سلول های زایا و انواع مختلفی از سرطان ها دیده شده است. یکی از اعضای این خانوادهMAGEA۴ می باشد که این آنتی ژن با انواع تومورها در ارتباط است. از آنجا که عملکرد این ژن هنوز به درستی مشخص نشده است، هدف از این مطالعه تکثیر و کلونینگ این ژن در وکتور بیانی به منظور تولید پروتئین نوترکیب بیان کننده MAGEA۴ است. مواد و روش ها: از طریقPCR و با استفاده از پرایمرهای اختصاصی حاوی برش آنزیم محدود کننده ژن MAGEA۴ تکثیر شد. محصول PCR خاص شده بین سایت های BamH۱ وXho۱ وکتور pTZ۵۷/R قرار گرفت و در سویه Top۱۰ اشرشیاکلی ترانسفورم گردید و توسط IPTG وX-Gal غربالگری شد. صحیح قرا گرفتن قطعه MAGEA۴ توسط برش آنزیمی و تعیین توالی بررسی گردید. سپس ساب کلونینگ این ژن در وکتور بیانی pRUF با همان جایگاه های برش آنزیمی صورت پذیرفت. یافته ها: تایید نهایی از طریق PCRکلنی و برش آنزیمی، تعیین توالی صورت گرفت. بنابراین ژنMAGEA۴ در جایگاه برشی آنزیمی پلاسمید pRUF کلون شد. نتیجه گیری: مطالعه حاضر گام مهمی جهت تولید پروتئین نوترکیب و استفاده از آن جهت پی بردن به عملکرد این ژن و اهداف درمانی به منظور درمان سرطان می باشد.

Authors

زهرا حجازی

Department of Biology, Damghan Branch, Islamic azad university,Damghan,Iran

محمد رضا عباس زادگان

Division of Human Genetics, Immunology Research Center,Avicenna Research Institute, Mashhad University of Medical Sciences

مهران غلامین

Division of Human Genetics, Immunology Research Center,Avicenna Research Institute, Mashhad University of Medical Sciences

محمد مهدی فرقانی فرد

Department of Biology, Damghan Branch, Islamic azad university,Damghan,Iran