زهرا حجازی - Department of Biology, Damghan Branch, Islamic azad university,Damghan,Iran
محمد رضا عباس زادگان - Division of Human Genetics, Immunology Research Center,Avicenna Research Institute, Mashhad University of Medical Sciences
مهران غلامین - Division of Human Genetics, Immunology Research Center,Avicenna Research Institute, Mashhad University of Medical Sciences
محمد مهدی فرقانی فرد - Department of Biology, Damghan Branch, Islamic azad university,Damghan,Iran

سابقه و هدف: کنسر تستیس آنتی ژن ها دست های از آنتی ژن ها می باشند که به طور ویژه بیان آن ها در سلول های زایا و انواع مختلفی از سرطان ها دیده شده است. یکی از اعضای این خانوادهMAGEA۴ می باشد که این آنتی ژن با انواع تومورها در ارتباط است. از آنجا که عملکرد این ژن هنوز به درستی مشخص نشده است، هدف از این مطالعه تکثیر و کلونینگ این ژن در وکتور بیانی به منظور تولید پروتئین نوترکیب بیان کننده MAGEA۴ است. مواد و روش ها: از طریقPCR و با استفاده از پرایمرهای اختصاصی حاوی برش آنزیم محدود کننده ژن MAGEA۴ تکثیر شد. محصول PCR خاص شده بین سایت های BamH۱ وXho۱ وکتور pTZ۵۷/R قرار گرفت و در سویه Top۱۰ اشرشیاکلی ترانسفورم گردید و توسط IPTG وX-Gal غربالگری شد. صحیح قرا گرفتن قطعه MAGEA۴ توسط برش آنزیمی و تعیین توالی بررسی گردید. سپس ساب کلونینگ این ژن در وکتور بیانی pRUF با همان جایگاه های برش آنزیمی صورت پذیرفت. یافته ها: تایید نهایی از طریق PCRکلنی و برش آنزیمی، تعیین توالی صورت گرفت. بنابراین ژنMAGEA۴ در جایگاه برشی آنزیمی پلاسمید pRUF کلون شد. نتیجه گیری: مطالعه حاضر گام مهمی جهت تولید پروتئین نوترکیب و استفاده از آن جهت پی بردن به عملکرد این ژن و اهداف درمانی به منظور درمان سرطان می باشد.

Cancer Testis Antigen, Cloning, MAGEA۴, Expression vector pRUF, کنسر تستیس آنتی ژن, MAGEA۴, کلونینگ, وکتوربیانی pRUF