غربالگری و شناسایی مولکولی اکتینوباکترهای مولد آنزیم تیروزیناز از خاک های کویر مرنجاب، غار هامپوئیل و جزیره هرمز

مقدمه: آنزیم های اکسیدکننده تیروزین یا تیروزینازها کاربردهای متنوعی در حوزه های درمانی، غذایی و محیطی دارند. با توجه به اهمیت اکتینوباکترها به عنوان یکی از مهم ترین باکتری های نویدبخش مولد ترکیبات زیست فعال و آنزیم های دارای کاربردهای زیست فناورانه، مطالعه حاضر با هدف غربالگری و شناسایی جدایه های مولد آنزیم تیروزیناز از نمونه های خاک های کویر مرنجاب، غار هامپوئیل و جزیره هرمز انجام شد. مواد و روشها: تعداد ۱۰ نمونه خاک از کویر مرنجاب و ۱۰ نمونه خاک از مناطق مختلف جزیره هرمز، جمع آوری و پس از کشت در محیط ISP۲ آگار، جدایه های اکتینوباکتر جداسازی و خالص سازی شدند. این جدایه ها و نیز جدایه های تهیه شده در پژوهش پیشین از غار هامپوئیل با کشت روی محیط تیروزین آگار و تیروزین براث غربالگری شدند. در ادامه فعالیت تیروزینازی جدایه های منتخب به صورت کمی ارزیابی شد؛ درنهایت، این جدایه ها با تعیین ترادف و آنالیز ژن ۱۶S rRNA شناسایی شدند. نتایج: از میان ۸۹ جدایه اکتینوباکتریایی غربالگری شده، کلنی های ۱۷ جدایه در محیط کشت تیروزین آگار هاله شفاف و رنگیزه قهوه ای - سیاه داشتند. این جدایه ها در غربالگری ثانوی به صورت کیفی ارزیابی شدند. نتایج غربالگری ثانوی تایید کرد ۱۱ جدایه مولد آنزیم تیروزیناز هستند. همچنین، نتایج سنجش کمی نشان دادند سویه های UTMC ۳۱۶۵ و UTMC ۳۲۳۳ به ترتیب با میزان فعالیت آنزیمی ۳۳ و ۳۵ واحد در میلی لیتر بیشترین فعالیت آنزیمی را دارند. این دو جدایه ازنظر ترادف ژن ۱۶S rRNA به ترتیب ۶۷/۹۹ و ۸۸/۹۹ درصد شباهت به سویه های Streptomyces tendae و Streptomyces thermocarboxydus داشته اند. بحث و نتیجهگیری: نتایج این پژوهش نشان دادند خاک های ایران دارای اکتینوباکترهای توانمند در زمینه تولید آنزیم تیروزیناز هستند. این جدایه ها به جنس Streptomyces متعلق اند که از غار هامپوئیل جدا شده بودند.

Keywords:

اکتینوباکترها , استرپتومایسس , تیروزیناز , جزیره هرمز , غار هامپوئیل , غربالگری اولیه , غربالگری ثانویه , شناسایی مولکولی , کویر مرنجاب