بررسی بیان پروتئین های P۱۶ و DAPK در رده ی سلولی لوسمیک HL۶۰ در مجاورت با آلکالوئید گیاهی
عنوان مقاله: بررسی بیان پروتئین های P۱۶ و DAPK در رده ی سلولی لوسمیک HL۶۰ در مجاورت با آلکالوئید گیاهی
شناسه ملی مقاله: JR_JPSMH-11-3_005
منتشر شده در در سال 1395
شناسه ملی مقاله: JR_JPSMH-11-3_005
منتشر شده در در سال 1395
مشخصات نویسندگان مقاله:
علی نوروزی عقیده - AJA university of Medical Sciences
حامد سلیمانی ثمرخزان - Tehran university of Medical Sciences
محرم احمدنژاد - Blood Transmission Organization
خلاصه مقاله:
علی نوروزی عقیده - AJA university of Medical Sciences
حامد سلیمانی ثمرخزان - Tehran university of Medical Sciences
محرم احمدنژاد - Blood Transmission Organization
مقدمه: تغییرات اپیژنتیک و از آن جمله متیلاسیون DNA در ناحیه پروموتور ژن های سرکوبگر تومور به عنوان یکی از مهم ترین مکانیسمهای ایجاد بدخیمیهای خونی مطرح است. امروزه استفاده از مواد طبیعی که دارای اثر هایپومتیلاسیون بر DNA میباشند مورد توجه فراوان قرار گرفته است. Harmine یکی از آلکالوئیدهای مشتق از گیاه اسپند است که دارای خاصیت هیپومتیله کنندگی و ضدتکثیری بر روی رده های سلولی لوسمیک میباشد. از آنجائی که ژن های P۱۶ و DAPK بعنوان ژن های سرکوبگر تومور در برخی بدخیمیهای خونی بصورت هایپرمتیله میباشند، لذا در این مطالعه تاثیر آلکالوئید گیاهی Harmine بر تکثیر رده سلولی HL۶۰ و بیان این دو ژن در این رده سلولی بررسی شد تا گامی در جهت روشن شدن مکانیسم اثر این داروی گیاهی و استفاده از مواد طبیعی در درمان سرطانهای خون برداشته شود.
مواد و روش ها: رده سلولی لوسمیک HL-۶۰ در فلاسک حاوی محیط کشت RPMI، سرم جنینی گوساله، پنی سیلین و استرپتومایسین در دمای ۳۷ درجه و دی اکسید کربن ۵ درصد به مدت ۵ روز کشت داده شد. تاثیر غلظتهای مختلف Harmine بر تکثیر سلولی در مقایسه با ۵-azacytidine به روش دستی و با استفاده از لام نئوبار و رنگ تریپان بلو در ساعات مختلف ۲۴ ساعت ، ۴۸ ساعت و ۷۲ ساعت تعیین گردید. بیان ژن های P۱۶ و DAPK پس از ساخت cDNA و طراحی پرایمرهای اختصاصی در سایت NCBI، با روش Real-time PCR بررسی شد. آنالیز آماری دادهها با نرم افزار SPSS انجام گرفت.
یافته ها: نتایج بدست آمده نشان داد که Harmine در تمامی غلظتها موجب کاهش تکثیر سلولی می شود. بطوری که Harmine در غلظتهای g/mlµ ۲۵.۶ و ۱۰۲.۴ و پس از ۷۲ ساعت ، تکثیر سلولی را در مقایسه با نمونه کنترل به ترتیب به میزان۵۰ و ۷۸ درصد کاهش داد (p<۰.۰۰۱). همچنین Harmine موجب افزایش بیانDAPK می شود اما این افزایش به لحاظ آماری فقط در غلظت g/mlµ ۱۰۲.۴ و فقط در مورد DAPK معنی دار است (p<۰.۰۰۵).
بحث و نتیجه گیری: نتایج این مطالعه نشان داد کهHarmine دارای خاصیت ضدتکثیری وابسته به دوز و زمان بر روی رده سلولی لوسمیکHL۶۰ است. همچنین Harmine موجب افزایش بیانDAPK می شود که این مسئله با توجه به نتایج دیگر مطالعات میتواند ناشی از هایپومتیله شدن پروموتور این ژن باشد. مطالعات بیشتر جهت روشنتر شدن مکانیسم اثر Harmine بر سلول های سرطانی لازم است.
کلمات کلیدی: HL۶۰, Harmine, P۱۶, DAPK, Harmine, HL۶۰, P۱۶, DAPK
صفحه اختصاصی مقاله و دریافت فایل کامل: https://civilica.com/doc/1412715/