القای مقاومت به ویروس موزائیک خیار با استفاده از سازه سنجاق سری ژن * ۲b

اغلب ویروس های گیاهی و جانوری با رمزگذاری پروتئین های مهارکننده خاموشی ژن پس از ترانویسی از خود محافظت می کنند. استفاده از مقاومت به واسطه RNA یکی از روش های موثر مهندسی ژنتیک در ایجاد مقاومت به ویروس ها محسوب می شود. در تحقیق حاضر امکان القای مقاومت نسبت به ویروس موزائیک خیار (CMV) با استفاده از ترادفی از چارچوب خوانش ژن ۲b این ویروس که پروتئین سرکوب کننده خاموشی ژن را رمزگذاری می کند بررسی شد. بدین منظور یک سازه سنجاق سری واجد اینترون (S۲) با استفاده ازترادفی از ژن مورد اشاره ساخته شد. هم چنین از سازه فاقد ترادف ویروس (S۱) نیز به عنوان شاهد استفاده شد. ابتدا سازه ها در حاملpHANIBALL ساخته و سپس به حامل بیان گیاهی pART۲۷ منتقل شدند. از سویه GV۳۱۰۱ اگروباکتریوم (Agrobacterium tumefaciens) برای تولید توتون تراریخت استفاده شد. تعداد ۴۰ گیاه تراریخت واجد سازه S۲ باززایی و به خاک منتقل شدند و سپس به منظور ارزیابی مقاومت آنها نسبت به CMV، با این ویروس مایه زنی شدند. نتایج آزمون الیزا و نیز علایم ظاهری گیاهان نشان داد که به ترتیب ۳۳ و ۳۰ درصد از گیاهان تراریخت نسبت به ویروس مقاوم بوده و یا در بروز علایم و آلودگی تاخیر داشتند.

Keywords:

ویروس موزائیک خیار , خاموشی ژن پس از ترانویسی , سرکوب کننده خاموشی ژن , مقاومت , گیاهان تراریخت , سازه سنجاق سری