واکنش زنجیره ای پلیمراز ایمونوکپژر زمان واقعی RT-IPCR بدون تداخل پروتئین A برای تشخیص مناسب انتروتوکسین استافیلوکوکال B از نمونه های غذایی و محیطی

واکنش زنجیره ای پلیمراز ایمنوکپچر زمان واقعی RT-IPCR برای تشخیص انتروتوکسین اورئوس استافیلوکوکال B SEB از نمونه هایی غذایی و محیطی ساخته شده است. این واقعیت را در نظر گرفتیم که ایمونوگلوبولین G ضد انتروتوکسین اورئوس استافیلوکوکال IgG,B به سمت پروتئین A تمایل دارد که توسط تقریبا تمام استافیلوکوکوس اورئوس ها تولید می شود و بازخوانی مثبت کاذب در تمام سنجش های مبتنی بر ایمنی، ایجاد می کند. این تحقیق از آنتی بادی ضد انتروتوکسین استافیلوکوکول B یا ضد SEB مرغی با نام مختصر SEB-IgY به عنوان نشانگر تسخیری استفاده کرده ایم زیرا واکنش پذیری ایمونوگلوبولین Y با پروتئین A و آنتی بادی بیوتینیله شده مونوکلونال خاص انتروتوکسین استافیلوکوکال B SEB -Mab چندان کارآمد نیست. این مونوکلونال به عنوان یک نشانگر آشکارساز برای افزایش واکنش زنجیره ای پلیمراز زمان واقعی و تولید سیگنال با ژن گزارشگر ترکیب می شود. حساسیت و گزینش سنجش با دقت با استفاده از انتروکسین ها و سایر توکسین ها ارزیابی شدند. واکنش زنجیرهای پلیمراز ایمنوکپچر زمان واقعی RT-IPCR بسیار دقیق و حساس است. fg/Ml ۱۰۰. کاربرد عملی این سنجش با استفاده از نمونه غذایی ترکیب شده با ماده غی سمی و نمونه های غذایی حاوی آلودگی های طبیعی آزمایش شد. دقت و حساسیت روش واکنش زنجیره ای پلیمراز ایمونوکپچر زمان واقعی از طریق این غذاها تغییر نکردو باز هم قادر به تشخیص آسان انتروتوکسین استافیلوکوکال B بود. به علاوه، اعتباراین سنجش از طریق مقایسه با واکنش زنجیرهای پلیمراز خانگی، تعیین شد و نتیجه معتبر به دست آمد. از سنجش پیشرفته در این تحقیق می توان به عنوان یک سیستم تشخیص ارزان انتروتوکسین استافیلوکوکال B در آزمایشگاهی تست غذاهای معمولی استفاده کرد.

Keywords:

واکنش زنجیره ای پلیمراز زمان واقعی , انتروتوکسین , B , آنتی بادی , ایمونوگلوبولین Y , پروتئین A