همسانه سازی، بیان و تخلیص بخش خارج غشایی پروتئین Tir از باکتری E.coli O۱۵۷:H۷ و ارزیابی ساختاری آن

Publish Year: 1400
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: Persian
View: 278

This Paper With 10 Page And PDF Format Ready To Download

  • Certificate
  • من نویسنده این مقاله هستم

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این Paper:

شناسه ملی سند علمی:

JR_NCMBJ-12-46_002

تاریخ نمایه سازی: 7 تیر 1401

Abstract:

سابقه و هدف باکتری اشرشیاکلی انتروهموراژیک (Enterohemorrhagic E. coli) سویه­ی O۱۵۷:H۷ یک پاتوژن مهم انسان و حیوان است که در انسان موجب بروز اسهال خونریزی دهنده و سندروم اورمی همولیتیک می شود. اتصال به سلول­های میزبان اولین گام در تثبیت این باکتری است که به واسطه­ی سیستم ترشحی نوع  (T۳SS) III و از طریق میان­کنش بین پروتئین­های ترشحی صورت می­گیرد. Tir پروتئینی است که پس از بیان در باکتری و از طریق  T۳SS به سلول میزبان منتقل و در غشای آن مستقر می شود و نقش مهمی در اتصال باکتری به میزبان دارد. هدف از این تحقیق ساخت سازه ژنی است که دارای فاکتورهای ویرولانس Tir می­باشد. مواد و روش­ ها: :  طراحی پرایمر اختصاصی برای ژن tir با استفاده از نرم افرازOligo  انجام شد و تکثیر ژن به وسیله واکنش    PCRاز روی DNA الگو صورت گرفت. پس از واکنش­های هضم آنزیمی و الحاق ژن درون ناقل بیانی pET۲۸a  ، انتقال ناقل به درون میزبان بیانی انجام شد. پس از تایید همسان­سازی ژن، بیان نوترکیب پروتئین   Tirبا استفاده از القاگر IPTG  صورت گرفت. برای تایید پروتئین Tir  آنالیز وسترن بلات انجام شد.  یافته ها: : همسان سازی ژن tir درون وکتور pET۲۸a به شکل مناسب بین جایگاه­های مطلوب انجام شد و پروتئین Tir پس از القا، پروتئین نوترکیب بیان  مناسب و قابل توجهی نشان داد. آنتی بادی مورد استفاده در وسترن بلات نیز توانست به شکل مناسبی Tir را شناسایی کند. نتیجه گیری: در این مطالعه، سازه پایدار محتوی ژن tir ساخته شد که بیان نوترکیب قابل توجهی از پروتئین Tir را از خود نشان داد. بنابراین این سازه را می توان برای تولید پروتئین Tir جهت مطالعات ایمنی زایی علیه E.coli O۱۵۷:H۷  به کاربرد..  

Authors

شیلا فلسفی

Department of Biochemistry, Pharmaceutical Sciences Branch, Faculty of New Technologies, Islamic Azad University, Tehran, Iran.

جعفر امانی

Applied Microbiology Research Center, Systems Biology and Poisonings Institute, Baqiyatallah University of Medical Sciences, Tehran, Iran

سیدعلی میرحسینی

Applied Microbiology Research Center, Systems Biology and Poisonings Institute, Baqiyatallah University of Medical Sciences, Tehran, Iran

مراجع و منابع این Paper:

لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این Paper را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود Paper لینک شده اند :
  • Nazarian S, Gargari SL, Rasooli I, Alerasol M, Bagheri S, ...
  • Fatima R, Aziz M. Enterohemorrhagic Escherichia Coli (EHEC). StatPearls [Internet]: ...
  • Abe A, de Grado M, Pfuetzner RA, Sanchez-Sanmartin C, Devinney ...
  • Schwidder M, Heinisch L, Schmidt H. Genetics, toxicity, and distribution ...
  • Eklund M. ENTEROHEMORRHAGIC Escherichia coli (EHEC) FINDINGS FROM HUMANS IN ...
  • Cepeda-Molero M, Berger CN, Walsham ADS, Ellis SJ, Wemyss-Holden S, ...
  • Scaletsky ICA. Enteropathogenic Escherichia coli. The Universe of Escherichia coli: ...
  • Dey S, Chakravarty A, Guha Biswas P, De Guzman RN. ...
  • Gaytan MO, Martinez-Santos VI, Soto E, Gonzalez-Pedrajo B. Type Three ...
  • Paton AW, Manning PA, Woodrow MC, Paton JC. Translocated intimin ...
  • Knutton S, Baldwin T, Williams PH, McNeish AS. Actin accumulation ...
  • Fan HY, Wang L, Luo J, Long BG. Protection against ...
  • Kordbacheh E, Nazarian S, Hajizadeh A, Fasihi-Ramandi M, Fathi J. ...
  • Amani J, Salmanian AH, Rafati S, Mousavi SL. Immunogenic properties ...
  • Nagano K, Taguchi K, Tokoro S, Tatsuno I, Mori H. ...
  • Nazarian S, Gargari SL, Rasooli I, Alerasol M, Bagheri S, ...
  • Fatima R, Aziz M. Enterohemorrhagic Escherichia Coli (EHEC). StatPearls [Internet]: ...
  • Abe A, de Grado M, Pfuetzner RA, Sanchez-Sanmartin C, Devinney ...
  • Schwidder M, Heinisch L, Schmidt H. Genetics, toxicity, and distribution ...
  • Eklund M. ENTEROHEMORRHAGIC Escherichia coli (EHEC) FINDINGS FROM HUMANS IN ...
  • Cepeda-Molero M, Berger CN, Walsham ADS, Ellis SJ, Wemyss-Holden S, ...
  • Scaletsky ICA. Enteropathogenic Escherichia coli. The Universe of Escherichia coli: ...
  • Dey S, Chakravarty A, Guha Biswas P, De Guzman RN. ...
  • Gaytan MO, Martinez-Santos VI, Soto E, Gonzalez-Pedrajo B. Type Three ...
  • Paton AW, Manning PA, Woodrow MC, Paton JC. Translocated intimin ...
  • Knutton S, Baldwin T, Williams PH, McNeish AS. Actin accumulation ...
  • Fan HY, Wang L, Luo J, Long BG. Protection against ...
  • Kordbacheh E, Nazarian S, Hajizadeh A, Fasihi-Ramandi M, Fathi J. ...
  • Amani J, Salmanian AH, Rafati S, Mousavi SL. Immunogenic properties ...
  • Nagano K, Taguchi K, Tokoro S, Tatsuno I, Mori H. ...
  • نمایش کامل مراجع