شناسایی نشانگرهای ریزماهواره پیوسته به ژن مقاومت به بیماری PVY در توتون با استفاده از روش تجزیه تفرق توده ای
عنوان مقاله: شناسایی نشانگرهای ریزماهواره پیوسته به ژن مقاومت به بیماری PVY در توتون با استفاده از روش تجزیه تفرق توده ای
شناسه ملی مقاله: JR_PLNTI-3-4_003
منتشر شده در در سال 1393
شناسه ملی مقاله: JR_PLNTI-3-4_003
منتشر شده در در سال 1393
مشخصات نویسندگان مقاله:
مرضیه شازده احمدی - محققین مرکز تحقیقات و آموزش توتون تیرتاش، بهشهر، مازندران، ایران
محمد رضا صلواتی میبدی - مرکز تحقیقات و آموزش توتون تیرتاش، بهشهر، ایران
خلاصه مقاله:
مرضیه شازده احمدی - محققین مرکز تحقیقات و آموزش توتون تیرتاش، بهشهر، مازندران، ایران
محمد رضا صلواتی میبدی - مرکز تحقیقات و آموزش توتون تیرتاش، بهشهر، ایران
یکی از مهمترین بیماری های ویروسی خسارت زای توتون در ایران و برخی از نقاط جهان ویروس Y سیبزمینی ((PVY است که نقش مهمی در کاهش کمیت و کیفیت محصول توتون دارد. موثرترین و بهترین روش برای کاهش خسارت این ویروس، اصلاح ارقام مقاوم نسبت به این بیماری است. از نشانگرهای مولکولی برای نشاندار کردن ژن های مقاومت در برنامه های بهنژادی استفاده می شود. به منظور شناسایی نشانگرهای مولکولی پیوسته با ژن های مقاومت به PVY در توتون، ابتدا در سال اول، تلاقی اولیه بین دو والد VAM (مقاوم) و K۳۲۶ (حساس) انجام شد، سپس بذرهای F۱ به دست آمده کشت شده و بذر F۲ به دست آمد. بذرهای F۲ حاصل در سال دوم، در مزرعه تحقیقاتی مرکز تحقیقات و آموزش توتون تیرتاش کاشته شدند. گیاهان F۲ با جدایه خالصسازی شده سویه O ویروس PVY مایهزنی شدند و سپس مورد ارزیابی های فنوتیپی قرار گرفتند. توسعه بیماری PVY با محاسبه سطح زیر منحنی پیشرفت آلودگی تعیین شد. در ادامه کار از ده بوته مقاوم و ده بوته حساس به PVY، بر اساس علایم مزرعه ای نمونه برگ تهیه گردید. روی این نمونهها برای تایید مقاومت و حساسیت به PVY آزمون الایزا انجام شد و بر اساس نتایج الایزا، بوته های حساس و مقاوم شناسایی شدند. در این تحقیق با استفاده از ۱۰۰ جفت آغازگر SSR انتخابی و همچنین به کارگیری روش تجزیه تفرق تودهای اقدام به شناسایی نشانگرهای ریزماهواره پیوسته با ژن مقاومت به PVY در دو توده مقاوم و حساس به این بیماری و همچنین بوته های جمعیت F۲ گردید. سه ترکیب جفت آغازگر به نام های PT۳۰۰۰۲، PT۲۰۱۶۵ و PT۲۰۳۵۷ در DNA دو توده مقاوم و حساس تولید چندشکلی نمودند. این جفت آغازگرها بعد از آزمون روی تک بوته های دو توده، روی تک بوته های جمعیت F۲ مورد آزمون و تجزیه قرار گرفتند. در نهایت، فاصله نشانگرها از ژن مقاومت با استفاده از نرم افزار Mapmaker Ver.۳.۰ تعیین گردید. نشانگر PT۳ با فاصله ۵/۱۷ سانتی مورگان در موقعیت ناجفت و دو نشانگر PT۱ و PT۲ به ترتیب با فاصله ۱/۱۸ و ۴/۳۷سانتی مورگان از ژن مقاومت قرار داشتند
کلمات کلیدی: PVY, ریز ماهواره, جفت آغازگر, توتون, چند شکلی
صفحه اختصاصی مقاله و دریافت فایل کامل: https://civilica.com/doc/1485907/