اثر استفاده از سطوح مخلتف لوتئولین بر کاهش میزان مالون دی آلدهید و افزایش تحرک و زنده مانی اسپرم خروس راس ۳۰۸ طی فرایند انجماد و یخ گشایی

چکیده مبسوط مقدمه و هدف: استرس اکسیداتیو یک عامل مهم در عملکرد ضعیف اسپرم است که باعث تغییرات مورفولوژیکی، و آسیب اکسیداتیو می شود، پژوهش های مختلف نشان داده اند آنتی اکسیدان ها میتوانند تا حدودی  از آسیب های اکسیداتیو طی انجماد بکاهند. درواقع آنتی اکسیدان ها باعث کاهش، حذف و غیر فعال سازی رادیکال های آزاد می شوند، بسیاری از ترکیبات نظیر برخی از عصاره های گیاهی، برخی مواد شیمیایی صنعتی و برخی از اسیدهای آمینه می توانند به عنوان آنتی اکسیدان فعالیت کرده و رادیکال های آزاد را در محیط خنثی کنند لوتئولین عضو مهمی از خانواده فلاونوئیدها است و به صورت گلیکوزیله در گیاهان وجود دارد و بر اساس مطالعات مشخص شده که لوتئولین دارای خواص آنتی اکسیدانی است. هدف از مطالعه حاضر کاهش میزان پراکسیداسیون لیپید و به حداقل رساندن تنش اکسیداتیو با افزودن سطوح مختلف لوتئولین در محیط انجمادی است. مواد و روش ها: نمونه های منی از ۱۵ قطعه خروس در سن ۲۸ هفتگی جمع آوری شدند. اسپرم­ گیری از خروس ­ها به روش مالش پشتی-شکمی انجام گرفت. برای از بین بردن اثرات فردی پس از ارزیابی­ های اولیه، نمونه ها با هم مخلوط شدند و جهت اعمال برنامه ­های انجمادی مورد استفاده قرار گرفتند.  پس از رقیق سازی نمونه ها و افزودن سطوح صفر (شاهد)، ۰/۲۵، ۰/۵، ۰/۷۵، ۱ و ۱/۲۵ میکرومولار لوتئولین، به رقیق­ کننده­ی پایه (لیک) اسپرم ها به نسبت ۱:۲۰ افزوده شدند. نمونه های مورد آزمایش در دمای °C۴ سردسازی شده و سپس در داخل ازت مایع منجمد گردیدند. یخ گشایی نمونه ها در دمای ۳۷ درجه سانتی گراد انجام گرفت و سپس فراسنجه های تحرک بوسیله سیستم کامپیوتری کاسا، زنده مانی با تست ایوزین نیگروزین، یکپارچگی غشای پلاسمایی با تست هاست، ریخت شناسی بوسیله تست هانکوک و میزان مالون دی آلدهید تولید شده اندازه گیری شد و سپس داده های حاصل در قالب طرح کاملا تصادفی آنالیز شد. یافته ها: نتایج به دست آمده نشان داد که افزودن سطوح ۰/۷۵ ، ۱ و ۱/۲۵ میکرومول سبب افزایش معنی داری در تحرک کل و سطوح ۰/۷۵ و ۱ باعث افزایش تحرک پیش رونده و VAP شد. علاوه بر این سطح ۱ میکرومول لوتئولین سبب افزایش معنی داری در فراسنجهVSL شد (۰/۰۵ >P). نتایج نشان داد که سطوح ۰/۷۵ و ۱ میکرومول باعث افزایش معنی داری در زنده مانی و سلامت غشا شد و همچنین سطح ۰/۷۵ میکرومول لوتئولین باعث شد میزان مالون دی آلدهید و درصد اسپرم هایی با ریخت شناسی غیرطبیعی کاهش پیدا کند (۰/۰۵ >P). نتیجه گیری: نتایج این پژوهش نشان داد که افزودن لوتئولین در رقیق کننده طی انجماد و یخ گشایی می تواند تاثیر مثبتی در بهبود کیفیت اسپرم خروس داشته باشد و متعاقبا سبب افزایش تحرک کل و پیش رونده بعد از انجماد و یخ گشایی گردد و همینطور سطح ۰/۷۵ میکرومولار توانست بهترین عملکرد را در بین سطوح مختلف افزوده شده در رقیق کننده داشته باشد.

Keywords:

Flavonoids , Oxidative stress , Rooster sperm , اسپرم خروس , تنش اکسیداتیو , فلاونویید