سهیلا رهنمایی یحیی آبادی - Payame Noor University
حسین هنری - Department of Biology, Faculty of Basic Sciences, Imam Hossein University
مسعود عبدالهی - Department of Biology, Faculty of Basic Sciences, Imam Hossein University
سید مجتبی آقایی - Department of Biology, Faculty of Basic Sciences, Imam Hossein University
محمد علی ابراهیمی - Payame Noor University

زمینه و هدف: عصاره برگ های دارواش (Viscum album L) دارای پروتئین MLI از نوع RIP۲ (پروتئین های غیرفعال ریبوزومی تیپ ۲) با خواص لکتینی هستند. STxB شیگا توکسین به عنوان یک ایمونواجوانت و حامل، مطرح بوده و به گیرنده سطح سلولی خود به نام Gb۳ متصل می گردد که روی اکثر سلول های بدن بیان می شود. در این مطالعه، بیان آنتی ژنML۱-stxB  در E. coli و تولید آنتی بادی آن در موش سوری بررسی گردید. روش بررسی: در این مطالعه تجربی، پلاسمید pUC۵۷ حاوی ژن MLI با جایگاه های آنزیمی NdeI و SalI در وکتور بیانی pET۲۸a(+)-stxB، زیرهمسانه سازی شد و به باکتری E. coli سویه BL۲۱(DE۳) تراریخت (ترانسفورم) گردید. بیان کاست ژنی MLI-StxB تحت القایIPTG  انجام گرفت. پس از تخلیص، پروتئین نوترکیب MLI-STxB به وسیله ستون نیکل کروماتوگرافی در چهار نوبت متوالی به موش های سوری تزریق شد. یافته ها: در این مطالعه، ژن ML۱-stxB کلون شده در وکتور بیانی pET۲۸a(+)، با واکنش PCR و آنالیز آنزیمی تایید گردید. همچنین پروتئین نوترکیب تولیدشده به وسیله SDS-PAGE و لکه گذاری وسترن مورد تایید قرار گرفت، سپس آنتی بادی تولیدشده از سرم موش جداسازی و با روش تست ELISA بررسی گردید. نتیجه گیری: براساس نتایج این مطالعه، پروتئین ML۱ دارای خاصیت غیرفعال کننده ریبوزومی و STxB نقش یاوری و حاملی دارد؛ لذا این پروتئین نوترکیب، کاندیدای واکسن علیه سم دارواش شیگلا دیسانتری بوده که از آنتی بادی آن می توان به عنوان شناساگر استفاده کرد.

Escherichia coli, Subcloning, Shigella, Mistletoe Lectin, اشرشیاکلی, زیرهمسانه سازی, دارواش, شیگلا.