محدثه کوهی چاپان - کارشناس ارشد زیست شناسی سلولی و مولکولی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه شهید مدنی آذربایجان، تبریز، ایران.
سولماز منیری جواد حصاری - استادیار گروه زیست شناسی سلولی و مولکولی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه شهید مدنی آذربایجان، تبریز، ایران.
فرشاد درویشی هرزویلی - استاد گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه الزهراء، تهران، ایران.
کاترین مادزاک - محقق بالارتبه، انستیتو تحقیقات ملی کشاورزی، غذا و محیط، دانشگاه Prais-Saclay، پاریس، فرانسه.

مقدمه: ویروس­ های پاپیلومای انسانی (HPV) با بیش از ۱۰۰ تیپ، به دو دسته­ با ریسک پایین و بالا تقسیم می­ شوند که تیپ­ های ۱۶ و ۱۸ به تنهایی در ۷۰% موارد سرطان گردنه­ رحم دخیل­ اند. در حال حاضر، توسعه­ پروتئین ­های نوترکیب HPV با هدف واکسیناسیون یا درمان مورد توجه دانشمندان می باشد. از این رو، مطالعه حاضر با هدف ساخت یک پلاسمید نوترکیب عرضه کننده در سطح رمزگذار پروتئین E۶ ویروس پاپیلومای انسانی تیپ ۱۸ انجام شد.روش کار: قطعه­ ژنی رمزگذار پروتئین E۶ تیپ ۱۸ ویروس پاپیلومای انسانی (HPV۱۸) با استفاده از DNA فرد مبتلا به ویروس به عنوان الگو، با روش PCR آشیانه­ ای مورد تکثیر قرار گرفت و پس از برش آنزیمی دوگانه­ Hind III و SfiI، به درون پلاسمید عرضه­ کننده در سطح pINA۱۳۱۷-YLCWP۱۱۰ همسانه­ سازی شد.یافته ­ها: روش ­های مولکولی نظیر PCR و برش آنزیمی دوگانه صحت همسانه­ سازی پلاسمید­ نوترکیب pINA۱۳۱۷-YLCWP۱۱۰-E۶ را مورد تایید قرار داد. همچنین، نتایج به دست آمده از تعیین توالی به روش سنگر و هم­ردیفی با داده­ های موجود در بانک ژن منجر به تایید نهایی صحت توالی، ترادف و چارچوب قرار­ گرفتن قطعه­­ ژنی در جایگاه مناسب گردید.نتیجه­ گیری: نتایج این مطالعه، همسانه­ سازی موفق قطعه­ ژنی رمزگذار پروتئین E۶ ویروس HPV۱۸ را در پلاسمید عرضه کننده در سطح pINA۱۳۱۷-YLCWP۱۱۰-E۶ در جایگاه و جهت مناسب مورد تایید قرار داد. این پلاسمید در صورت بیان در میزبان مخمری Yarrowia lipolytica، قابلیت استفاده به عنوان واکسن، مارکر مولکولی یا جنبه­ درمانی خواهد داشت. 

پروتئین E۶ نوترکیب, پلاسمید عرضه کننده در سطح, تیپ ۱۸, ویروس پاپیلومای انسانی, همسانه ­سازی