فناوری تکثیر همدما بواسطه حلقه (LAMP) و کاربرد آن در تشخیص بیماریهای گیاهی

تکنیک تکثیر همدما DNA به واسطه حلقه (LAMP) که برای اولین بار توسط شرکت ژاپنی Eiken Chemical درسال ۱۹۹۸معرفی و طراحی شد، میتواند تا ۱۰۹ نسخه از DNA را در کمتر از یک ساعت تکثیر کند. همچنین به دلیل استفاده از دو تا سه جفت آغازگر (داخلی، خارجی و حلقه)، که تا هشت مکان خاص را روی DNA هدف تشخیص میدهند، در مقایسه با PCR معمولی که تنها میتواند دو جایگاه را در DNA هدف تشخیص دهد، بسیار اختصاصی عمل میکند. علاوه بر این، مرحله دناتوراسیون DNA، به دلیل فعالیت جابجایی Bst پلیمراز مورد استفاده در LAMP حذف میگردد . یکی دیگر از مزایای LAMP این است که تکثیر هم دما را میتوان بدون تجهیزات آزمایشگاهی پیشرفته تنها با استفاده از تجهیزات ساده نظیر حمام بنماری یا انکوباتور نیز انجام داد. محصولات LAMP را میتوان بسیار سریع تر از تکنیکهای استاندارد حتی با چشم غیر مسلح نیز شناسایی کرد. در سالهای اخیر این تکنیک بواسطه ترکیب آن با سایر روشهای مولکولی مانند رونویسی معکوس و تکثیر چندگانه توسعه بیشتری یافته است و به واسطه حساسیت و اختصاصیت بالا به عنوان ابزار تشخیصی مهم در تشخیص بیماری های عفونی ناشی از میکروارگانیسمها در انسان، دام و گیاه به کار گرفته میشود. همچنین تجاریسازی کیت تشخیصی میکروارگانیسم های بیماریزا از طریق لیوفیلایز کردن واکنشگرهای LAMP و پرایمرهای آن رو به گسترش است. در این مقاله مروری تکنیک LAMP همراه با کاربردهای آن در تشخیص میکروارگانیسمهای مختلف مورد بحث قرار خواهد گرفت. همچنین، انواع روشهای تشخیص LAMP از جمله تشخیص رنگ سنجی و فلورسنت، پایش در زمان واقعی با استفاده از کدورتسنج نیز مورد بررسی قرار خواهند گرفت.

Keywords:

تکثیر همدما بواسطه حلقه , Bst پلیمراز , بیمارگرهای گیاهی