نسترن هراتی - Biotechnology and Plant Breeding Department, Faculty of Agriculture, Ferdowsi University of Mashhad
نسرین مشتاقی - Biotechnology and Plant Breeding Department, Faculty of Agriculture, Ferdowsi University of Mashhad, Iran
عبدالرضا باقری - Biotechnology and Plant Breeding Department, Faculty of Agriculture, Ferdowsi University of Mashhad
سیدحسن مرعشی - Biotechnology and Plant Breeding Department, Faculty of Agriculture, Ferdowsi University of Mashhad

نخود (Cicer arietinum) در رقابت با علف های هرز بسیار حساس بوده و دچار کاهش عملکرد و کیفیت محصول می شود. لذا تولید گیاهان مقاوم به علف کش های عمومی نظیر گلایفوسیت مفید می باشد. در این تحقیق، ازAgrobacterium tumefaciens  سویه LBA۴۴۰۴ حاوی پلاسمید pBI۱۲۱ و ژن موتاسیون یافته epsps برای ایجاد مقاومت به علف کش گلایفوسیت استفاده شد که در آن ژن nptII به عنوان گزینشگر تحت پیش بر ۳۵S قرار گرفته است. به منظور انتقال ژن از محورهای جنینی نخود رقم ثمین و بیونیج استفاده شد. ریزنمونه ها پس از هم کشتی با سوسپانسیون باکتری به مدت سه روز در محیط هم کشتی B۵ قرار گرفت و پس از آن به منظور باززایی به محیط کشت MS به همراه غلظت مناسبی از هورمون های BAP، Kin و NAA منتقل گردید. درنهایت پس از گزینش های متوالی با استفاده از آنتی بیوتیک کانامایسین، ریشه زایی و استقرار گیاهان T۰ در محیط هیدروپونیک انجام شد و با استفاده از آزمون PCR، در ۱۵گیاه ژن اختصاصی epsps  و ژن  nptII تکثیر و تراریختگی آنها تایید شد. عدم آلودگی گیاهان مشکوک به تراریخته با استفاده از آغازگرهای نواحی ITS باکتری و همچنین با بررسی بیان ژن مورد نظر با استفاده از آزمون RT-PCR تایید شد و درصد تراریختگی در این بررسی ۷۵/۰ درصد بود.

Agrobacterium, genetic engineering, kanamycin, transgenic, weed, اگروباکتریوم, تراریخته, علف هرز, کانامایسین, مهندسی ژنتیک