CIVILICA We Respect the Science
(ناشر تخصصی کنفرانسهای کشور / شماره مجوز انتشارات از وزارت فرهنگ و ارشاد اسلامی: ۸۹۷۱)

Isolation and Purification of L-Asparaginase from Persian Gulf Streptomyces Isolates and Evaluation of It’s Cloned Gene Expression in Escherichia Coli by Real-Time and SDS-PAGE

عنوان مقاله: Isolation and Purification of L-Asparaginase from Persian Gulf Streptomyces Isolates and Evaluation of It’s Cloned Gene Expression in Escherichia Coli by Real-Time and SDS-PAGE
شناسه ملی مقاله: JR_JABS-10-3_019
منتشر شده در در سال 1399
مشخصات نویسندگان مقاله:

حدیثه سوفر - Department of Biochemistry, Faculty of Advanced Science and Technology, Tehran Medical Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran
کیومرث امینی - Department of Microbiology, Faculty of Basic Sciences, Saveh Branch, Islamic azad university, Saveh, Iran
سید محمد مسعود شوشتریان - Department of Biophysics & Biochemistry, Faculty of Advanced Science and Technology, Tehran Medical Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran

خلاصه مقاله:
زمینه و هدف: آنزیم ال آسپارژیناز کاربرد موثر در درمان سرطان لوسمی لنفوبلاستیک دارد. این آنزیم از منابع باکتریایی جداشده و به صورت تجاری به عنوان داروی ضد سرطان عرضه می شود. هدف از این پژوهش جداسازی و تخلیص آنزیم ال آسپاراژیناز از جدایه های استرپتومایسس خلیج فارس و بررسی بیان ژن کلون شده آن در باکتری اشریشیاکلی با Real-time و SDS-PAGE است. مواد و روش ها: جدایه های جنس استرپتومایسس از خلیج فارس جداسازی و توسط تست های بیوشیمیایی تعیین هویت شدند و سپس با روش واکنش زنجیره ای پلیمراز ژن ال آسپارژیناز از این استرپتومایسس ها جدا گردید. قطعه تکثیر یافته توسط روش TA کلونینگ به داخل وکتور بیانی pTG۱۹ وارد شد. در مرحله بعد وکتور نوترکیب با روش شوک با CaCl۲ به باکتری اشریشیاکلی ترانسفورم شد و با استفاده از روش های رایج تائید کلونینگ انجام گردید. نتایج: نتایج این پژوهش نشان داد که استرپتومایسس های جداشده از خلیج فارس قادر به تولید آنزیم ال آسپارژیناز می باشند. درنهایت ژن این آنزیم توسط وکتور با موفقیت به باکتری اشریشیاکلی ترانسفورم شد و با بازدهی بالا، آنزیم ال آسپاراژیناز تولید نمود.نتیجه گیری: پیدا کردن سویه های باکتریایی جدید تولیدکننده آنزیم ال آسپاراژیناز و استفاده تکنیک مهندسی ژن می تواند منجر به عملکرد بهتر این آنزیم ها شود و به وسیله آن گام بزرگی در مسیر افزایش و سهولت تولید ال آسپاراژیناز در صنعت داروسازی برداشت.

کلمات کلیدی:
L-Asparaginase, Streptomyces, Lymphoblastic Leukemia, ال-آسپارژیناز, استرپتومایسس, لوکمی لنفوبلاستیک

صفحه اختصاصی مقاله و دریافت فایل کامل: https://civilica.com/doc/1702419/