CIVILICA We Respect the Science
(ناشر تخصصی کنفرانسهای کشور / شماره مجوز انتشارات از وزارت فرهنگ و ارشاد اسلامی: ۸۹۷۱)

طراحی و ساخت حامل لنتی ویروسی بیان کننده miRNA-۴۹۹a و انتقال آن به سلول های بنیادی مزانشیمی انسان

عنوان مقاله: طراحی و ساخت حامل لنتی ویروسی بیان کننده miRNA-۴۹۹a و انتقال آن به سلول های بنیادی مزانشیمی انسان
شناسه ملی مقاله: JR_JMUMS-28-166_003
منتشر شده در در سال 1397
مشخصات نویسندگان مقاله:

وجیهه نشاطی - PhD Candidate, Biotechnology Research Center, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran
سمانه ملازاده - PhD in Biotechnology, Biotechnology Research Center, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran
بی بی صدیقه فضلی بزاز - Professor, Biotechnology Research Center, Institute of Pharmaceutical Technology, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran Professor, Pharmaceutical Control Department, School of Pharmacy, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran
مجید مجرد - Associate Professor, Medical Genetics Research Center, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran Associate Professor, Department of Medical Genetics, Faculty of Medicine, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran
زینب نشاطی - Assistant Professor, Department of Biology, Faculty of Science, Ferdowsi University of Mashhad, Mashhad, Iran
محمد امین کراچیان - Assistant Professor, Medical Genetics Research Center, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran Assistant Professor, Department of Medical Genetics, Faculty of Medicine, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran

خلاصه مقاله:
سابقه و هدف: وکتورهای لنتی ویروسی حامل های مناسبی برای انتقال ژن به سلول ها بوده و می توانند سبب بیان بالا و مداوم ژن ها در سلول های میزبان شوند. ریز RNA ها (miRNAs )، گروهی از RNA های غیر کد کننده کوچک هستند که بیان ژن را پس از رونویسی از طریق مهار ترجمه یا القاء تجزیه mRNA کنترل می کنند و از این طریق فرآیند های زیستی متعددی از جمله تمایز سلولی را تنظیم می نمایند. مطالعاتی نشان داده اند که miRNA-۴۹۹a در تمایز سلول های بنیادی به سلول های قلبی  نقش دارد. با توجه به مطالب ذکر شده، در این مطالعه ساخت وکتور لنتی ویروسی ناقل miRNA-۴۹۹a  جهت استفاده در تمایز سلول های قلبی مورد بررسی قرار گرفت. مواد و روش ها: رشته های p۳ و p۵ مربوط به miRNA-۴۹۹a طراحی و ساخته شده و در پلاسمید ویژه ای کلون شدند. برای اطمینان از ورود صحیح این رشته های نوکلئوتیدی، هضم آنزیمی و توالی یابی انجام گردید. سپس ذرات لنتی ویروسی حامل رشته های miRNA-۴۹۹a-۳p و p۵miRNA-۴۹۹a- ساخته شدند و برای ترانس داکشن سلول های مزانشیمی مغز استخوان انسان مورد استفاده قرار گرفتند. یافته ها: نتایج حاصل از هضم آنزیمی و توالی یابی، کلون شدن صحیح رشته های p۳ و p۵ مربوط به miRNA-۴۹۹a به داخل پلاسمید را نشان دادند. بیان بالای eGFP نشان دهنده کارایی بالای ترانس فکشن و ترانس داکشن بود. ویروس های حامل رشته های miRNA-۴۹۹a-۳p/۵p ساخته شده، توانستند سبب ترانس داکشن سلول های بنیادی مزانشیمی گردند. استنتاج: در این مطالعه حامل های لنتی ویروسی ناقل miRNA-۴۹۹a-۳p/۵p تولید شدند، که با توجه به میزان مناسب ترانس داکشن سلول های بنیادی مزانشیمی، می توانند در تمایز این سلول ها به سلول های قلبی مورد استفاده قرار گیرند.

کلمات کلیدی:
lentiviral vectors, MicroRNA, miRNA-۴۹۹a-۳p/۵p, differentiation, لنتی ویروس, ریز RNA, تمایز

صفحه اختصاصی مقاله و دریافت فایل کامل: https://civilica.com/doc/1786125/