علیرضا مرادآبادی - دانشکده پیراپزشکی دانشگاه علوم پزشکی کرمان، کمیته تحقیقات دانشجویی
علیرضا فارسی نژاد - استادیار دانشکده پیراپزشکی دانشگاه علوم پزشکی کرمان
احمد فاطمی - استادیار دانشکده پیراپزشکی دانشگاه علوم پزشکی کرمان

چکیده سابقه و هدف نئوپلاسم های میلوپرولیفراتیو، از جمله بدخیمی های خونی هستند که علایم بالینی بسیار متغیری دارند. تقسیم بندی بیماران میلوپرولیفراتیو به دو گروه دارای کروموزوم فیلادلفیا(Ph+) و فاقد آن(Ph-) می باشد. در گروه Ph- ، بیماری­های پلی سایتمی ورا، ترومبوسایتمی اساسی، میلوفیبروز اولیه و دیگر بیماری های نادر قرار می­گیرد. این گروه از بیماران دارای جهش JAK۲ V۶۱۷F می­باشند که با درصدهای مختلف دیده می­شود. هدف از این مطالعه، اجرای روش اصلاح شده PCR-RFLP برای تشخیص جهشJAK۲ V۶۱۷F در بیماران مبتلا به نئوپلاسم های میلوپرولیفراتیو بود. مواد و روش ها در این مطالعه مقطعی، ۴۷ بیمار با درخواست آزمایش JAK۲ V۶۱۷F ، مورد بررسی قرار گرفتند. برای تمامی نمونه­ها آزمایش تشخیصی  JAK۲ V۶۱۷F با استفاده از روش استاندارد ARMS TaqMan Probe انجام شد. جهت تایید نهایی، برخی از نمونه­ها مورد توالی یابی ژنی قرار گرفتند. برای شناسایی ناحیه جهش با استفاده از روش PCR-RFLP ، آغازگر­های اختصاصی و آنزیم BsaXI استفاده شد. با توجه به این که در این مطالعه نمونه­های منفی و مثبت به همراه یک روش استاندارد برای تعیین جهش وجود داشت، محاسبه حساسیت و ویژگی این روش ۱۰۰% تعیین گردید. تحلیل نتایج توسط آزمون t انجام شد. یافته ها نتایج PCR-RFLP جهش JAK۲ V۶۱۷F برای تمامی نمونه­ها کاملا مشابه و منطبق با نتایج روش­های استانداردARMS TaqMan Probe  و تعیین توالی بود. نتیجه گیری روش PCR-RFLP دارای حساسیت تشخیصی قابل مقایسه­ای با روش­های Real Time PCR و تعیین توالی بود. مزیت این روش اصلاح شده، توانایی آن در افتراق انواع هموزیگوت و هتروزیگوت بیماران، وجود کنترل داخلی برای عملکرد آنزیم و هم چنین سهولت و صرفه اقتصادی آن است.

Key words: Myeloproliferative Disorders, PCR, Neoplasm, Philadelphia Chromosome, کلمات کلیدی: اختلالات میلوپرولیفراتیو, PCR, نئوپلاسم, کروموزوم فیلادلفیا