نوشین هاشمی - دانشگاه علوم پزشکی خراسان شمالی، بجنورد، ایران
سیدحسین حجازی - مرکز تحقیقات بیماری های پوستی و لیشمانیوز، گروه انگل و قارچ شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران
میترا هاشمی - معاونت پژوهشی، دانشگاه علوم پزشکی خراسان شمالی، بجنورد، ایران
سیروس هاشمی - دانشگاه علوم پزشکی خراسان شمالی، بجنورد، ایران
محمد علی نیلفروش زاده - مرکز تحقیقات بیماری های پوست و سلول های بنیادی، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران

چکیده زمینه و هدف: لیشمانیوز، بیماری عفونی انگلی با انتشار وسیع در مناطق معتدله و گرمسیری است. با توجه به اینکه ارتقاء روش های تشخیص صحیح و سریع CL (Cutaneous Leishmaniasis) نقش به سزایی در کاهش عوارض بیماری به خصوص پیشگیری از بروز اسکارهای وسیع دارد، هدف از این مطالعه ارزیابی روش PCR-RFLP با پرایمرهای ITSRL و L۵.۸Sدر مقایسه با روش های مستقیم میکروسکوپی و کشت NNN برای تشخیص CL می باشد. مواد و روش کار: در این مطالعه از بین افراد دارای ضایعه ی جلدی مشکوک به CL،۶۰ بیمار با Leishmanin Skin Test (LST) مثبت انتخاب و از هر کدام سه نمونه جهت بررسی میکروسکوپی، کشت در محیط NNN وPCR–RFLP تهیه گردید. لام های رنگ آمیزی شده با لنز روغنی×۱۰۰ جهت مشاهده اشکال اماستیگوت انگل آزمایش شد. جهت کشت مقداری از مواد برداشت شده از حاشیه ضایعه بیمار به محیط NNN ، انتقال داده شد. پس از استخراجDNA با استفاده از روش PCR-RFLP تکثیر از توالی ITS۱ با پرایمرهای اختصاصی صورت گرفت و بعد از هضم باآنزیم HaeIII ایزوله ها درمقایسه با سویه های استاندارد تعیین گونه شد. داده ها با استفاده از آمار توصیفی و تست حساسیت با استفاده از نرم افزار SPSS۱۵ مورد تجزیه وتحلیل قرار گرفت. یافته ها: روش میکروسکوپی در ۳۶ مورد از ۶۰ بیمار (%۶۰) و نتایج کشت نمونه ها در محیط NNN در ۳۷ مورد (%۶۲) مثبت شد. در روش PCR-RFLP ۵۵ مورد (%۹۱)، با این روش مثبت و تعیین گونه شد. نتیجه گیری: با توجه به نتایج حاصل از این مطالعه و امکان تشخیص گونه ها با روش PCR-RFLP، فراهم نمودن امکانات استفاده از این تکنیک، همراه با روش مستقیم میکروسکوپی و کشت NNN در موارد لازم، در مراکز درمانی پیشنهاد می گردد.

Keyword: PCR-RFLP, direct microscopy, Cutaneous Leishmaniasis, culture, واژه های کلیدی:PCR-RFLP, مستقیم میکروسکوپی, کشت, لیشمانیوز جلدی