CIVILICA We Respect the Science
(ناشر تخصصی کنفرانسهای کشور / شماره مجوز انتشارات از وزارت فرهنگ و ارشاد اسلامی: ۸۹۷۱)

جداسازی و تعیین خصوصیت برخی ژن های افتراقی در واکنش تحمل به شوری درگیاه نعناع فلفلی با استفاده از تکنیک cDNA-AFLP

عنوان مقاله: جداسازی و تعیین خصوصیت برخی ژن های افتراقی در واکنش تحمل به شوری درگیاه نعناع فلفلی با استفاده از تکنیک cDNA-AFLP
شناسه ملی مقاله: SADHE01_037
منتشر شده در اولین همایش ملی توسعه پایدار کشاورزی ومحیط زیست سالم در سال 1391
مشخصات نویسندگان مقاله:

حمیده قجر - دانشجوی کارشناسی ارشد بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشگاه علوم کشاورزی و من
حسن سلطانلو - استادیار گروه علوم اصلاح نبات و بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشگاه علوم کش
سیده ساناز رمضانپور - دانشیار گروه علوم اصلاح نبات و بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشگاه علوم کشا
سارا خراسانی نژاد - استادیار گروه علوم باغبانی، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی گرگان

خلاصه مقاله:
شوری یکی از مهمترین عوامل محدود کننده در بیش از 33 درصد زمین های زراعی است. شناسایی ساز و کار های مولکولی که در پاسخ گیاهان به شوری دخیل است می تواند به بهبود منابع ژنتیکی در اصلاح گیاهان کمک نماید. نعناع فلفلییک گیاه دارویی و معطر است که میزان روغن های ضروری موجود در آن تحت تاثیر عوامل محیطی قرار می گیرد. تکنیک cDNA-AFLP برای شناسایی برخی ژن های افتراقی پاسخ دهنده به تنش شوری در این گیاه به کار گرفته شد. این130 میلی مول در لیتر ،100 ،30 ، آزمایش در قالب طرح کاملا تصادفی با 3 تکرار و سطوح 0 NaCl انجام پذیرفت. RNAاستخراج و رشته اول cDNA با استفاده از آنزیم رونوشت بردار معکوس ساخته شد و رشته دوم از روی رشته اول با استفاده از آنزیم DNA پلیمراز ساخته شد. cDNA دو رشته ای با آنزیم های برشی PstI و TaqI هضم شد. تکثیر اولیه قطعاتcDNA برش یافته صورت پذیرفت و تکثیر ثانویه با استفاده از آغازگرهای انتخابی با دو نوکلئوتید اضافی انجام شد. محصولاتPCR روی ژل پلی آکریل آمید 3% جداسازی و باندهای دارای بیان افتراقی از ژل بریده شده و DNA آن تحت همان شرایطتکثیر ثانویه تکثیر شد. DNA های تکثیر شده در باکتری E.coli و با استفاده از کیت کلون جت همسانه سازی و سپس توالی یابی شدند. توالی های حاصل با استفاده از BlastX مورد ارزیابی و تحلیل قرار گرفت. نتایج نشان داد که ژن های جداسازی شده در سه گروه ژنی انتقال سیگنال، ژن های ساختاری و پروتئین های دفاعی گیاه طبقه بندی می شوند

کلمات کلیدی:
نعناع فلفلی، تنش شوری، cDNA-AFLP

صفحه اختصاصی مقاله و دریافت فایل کامل: https://civilica.com/doc/190602/