مطالعه تنوع مورفولوژیکی و ژنتیکی جدایه های Botrytis cinerea عامل کپک خاکستری توت فرنگی با استفاده از توالی یابی ناحیه ITS

توت فرنگی از گیاهان مهم کشت شده در شمال ایران بوده که میوه آن مصارف فراوانی در طب سنتی به منظور جلوگیری از ابتلا به بسیاری بیماری ها دارد. بیماری کپک خاکستری ناشی از Botrytis cinerea از مهمترین بیماری های توت فرنگی بوده که سالانه موجب خسارات زیادی به این محصول می شود. این تحقیق به منظور بررسی خصوصیات مورفولوژیکی و ژنتیکی و امکان تنوع بین جدایه ها در استان مازندران انجام شد. برای این منظور 22 جدایه از مزارع مناطق مختلف استان به دست آمد. اساس شناسایی اولیه صفات مورفولوژیک قارچ مانند رنگ کلنی، شکل، رنگ و ابعاد کنیدیوفور، شکل و ابعاد اسکلروت ها بود. در این بررسی ها تفاوت زیادی بین ایزوله های بدست آمده از مناطق مختلف مشاهده شد. با توجه به تنوع مشاهده شده جدایه ها به 7 گروه تقسیم شدند. جهت تعیین امکان تنوع ژنتیکی بین ایزوله ها از هر گروه یک نماینده انتخاب و سپس ناحیه ITS ( Internal Transcribed Spacer ( دی ان ای ریبوزومی جدایه ها با استفاده از جفت آغازگرهای ITS4 و ITS5 تکثیر شد. محصول پی سی ار پس از توالی یابی و همردیف سازی چندگانه با استفاده از نرم افزار CLUSTALX با سایر توالی های مربوطه ثبت شده در بانک ژن مقایسه گردید. درخت فیلوژنی جدایه ها با استفاده از نرم افزار MEGA5 ترسیم گشت. در تجزیه خوشه ای ، نمونه ها در حد تشابه 08 % در 5 گروه جای گرفتند. نتایج حاصل از این تحقیق حاکی از وجود تنوع بالای مورفولوژیکی و ژنتیکی بین جدایه های B. cinerea عامل کپک خاکستری توت فرنگی در مازندران می باشد.

Keywords:

تنوع ژنتیکی PCR , ITS , Botrytis , اسکلروت