روش تولید آنزیم های DNA پلیمراز Taq و Pfu
Publish place: Iranian Journal of Rangelands and Forests Plant Breeding and Genetic Research، Vol: 17، Issue: 1
Publish Year: 1388
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: Persian
View: 21
This Paper With 7 Page And PDF Format Ready To Download
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_IJRFP-17-1_012
تاریخ نمایه سازی: 29 شهریور 1403
Abstract:
آنزیمهای پلیمر کننده DNAی Taq و Pfu از آنزیمهای بسیار مهم در مطالعات ژنتیک مولکولی هستند و در آزمایشگاههای مولکولی در حجم زیادی مورد استفاده قرار میگیرند. این تحقیق به منظور تامین آنزیمهای یاد شده جهت آزمایشگاههای پرمصرف و یک روش ساده خالص کردن این آنزیمها از بقایای باکتری انجام گردید. ابتدا پلاسمیدهای حامل ژنهای تولید کننده آنزیمهای Taq و Pfu به طور جداگانه به نژادی از باکتری E. coli منتقل شد. باکتریهای تراریخته بر روی محیط کشت ۲x SOB به مدت ۵/۴ ساعت در دمای ۳۷ درجه سانتیگراد کشت شده و بعد آنزیم تولید گردید، آنزیمهای مورد نظر با روش خاصی که در تحقیق حاضر ارائه گردیده استخراج و خالص سازی گردیدند. به منظور آزمون کارآیی و تعیین میزان پرکننده مورد نیاز جهت رساندن غلظت آنزیم به سطح مطلوب از ماده رنگ آمیزی Bradford استفاده گردید. کارآئی و خلوص آنزیمهای تولید شده در مقایسه با آنزیم تجاری موجود در آزمایشگاه در تکثیر قطعهای از DNA ژنوم گیاه آرابیدوپسیس اکوتیپ کلمبیا توسط PCR مورد تایید قرار گرفت. بنابراین روش ارائه شده در این تحقیق برای تولید آزمایشگاهی و محلی آنزیم هایTaq و Pfu با خلوص بالا توصیه میگردد.
Keywords:
Authors
