ستاره توسلی - پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری
غلامرضا احمدیان - پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری

با افزایش روز افزون نیاز صنایع به تولید آنزیم هایی با کارایی و پایداری بیشتر و قابل بازیافت لزوم استفاده از فناوری DNA نو ترکیب در این عرصه حائز اهمیت می باشد. از اینرو بیان پروتئین های مورد نظر بر سطح سلولهای زنده با استفاده از این فناوری به منظور تولید بیوکاتالیست، می تواند جایگاه ویژه ای را در صنعت به خود اختصاص دهد. توانایی خانواده باسیلوس ها در تولید مقادیر فراوانی از آنزیم های خارج سلولی جایگاه ویژه ای را در صنعت به خود اختصاص دهد. توانایی خانواده باسیلوس ها در تولید مقادیر فراوانی از آنزیم های خارج سلولی جایگاه ویژه ای به آنها در بین تولید کنندگان آنزیم های صنعتی داده است. اسپور شکل نهفته باکتری و مقاوم ترین ساختار در طبیعت است. این ویژگی اسپور را به عنوان تکیه گاهی (حامل) مناسب در سیستم بیان سطحی معرفی کرده است. آنزیم بتا. گالاکتوزیداز یکی از مهمترین آنزیم های صنایع شیری است که با تجزیه لاکتور در تولید محصولات لبنی فاقد لاکتوز برای افرادی که قادر به تجزیه لاکتوز نمی باشند، کاربرد فراوانی دارد. در این مطالعه، با استفاده از تکنیک بیان در سطح اسپور، بیوکاتالیستی تولید شد که علاوه بر افزای پایداری انزیم به علت اتصال به سطح اسپور، مراحل خالص سازی آنزیم، تسهیل شده و از طرفی دیگر می توان بیوکاتالیست را نیز از محیط واکنش به سادگی استخراج کرد. با این هدف، ترادف ژنی cotC-lacA به ژنوم باکتری باسیلوس سوبتیلیس سویه( RH101(ΔcotC انتقال داده شد. سپس بیان آنزیم بتا. گالاکتوزیداز بر سطح اسپور با تکنیک های وسترن بلائینگ و ایمونرفلورسانس تأئید گردید. همچنین آزمایشات اولیه سنجش فعالیت آنزیمی نشان داده شد که این آنزیم پس از اتصال به سطح اسپور فعال می باشد.

بیوکاتالیست، حامل، سیستم بیان سطحی، پروتئین پوششی اسپور