مهندسی و بیان پپتید باکتریوسیدال بکتنسین در باسیلوس سوبتیلیس و ارزیابی فعالیت بیولوژیک آن

فعالیت باکتری های احیا کننده سولفات، موجب خوردگی سطوح فلزات و آلیاژ ها شده و در نتیجه زیان های اقتصادی فراوان بدنبال دارد. لذا تا کنون جهت کنترل و م هار فعالیت این دسته از میکروارگانیزم ها از استراتژی ه ای مختلفی استفاده شده است که یکی از موفق ترین آنها پوشش دهی سطوح با بایوفیلم های زنده Bsubtilis WB600 است که جهت بیان اختصاصی عوامل مختل باکتریوسیدال و ترح آنها به محیط خارج سلولی استفاده می ود. در تحقیق حاضر، از زنجیره پپتیدی بکتنسین به عنوان الگو استفاده شده است. این بایومولکول یک پپتید کاتیونی کوتاه است در زمره پپتیدهای آنتی باکتریال دسته بندی شده است و به عنوان عامل حفاظت کننده در مقابل خوردگی نقش مؤثری را ایفاء می کند. ابتدا با توجه به ترادف آمینواسیدی این پپتید، سایت های مورد نظر جهت موتاسیون و اینزرشن هدفمند انتخاب گردید لذا با افزایش اسیدامینه آرژینین در دو انتهای C- ترمینال و N- ترمینال آن تعداد شارژ مثبت در این ناحیه از مولکول افزوده گردید و نیز در طی موتاسیون هدفمند، اسید امینه والین موجود در طول زنجیره به تریپتوفان تغییر داده شد. پیشگویی ساختار هر یک از دو ترادف مذکور نیز با یکدیگر برابری نشان می داد. در ادامه ترادف الیگوهای موتانت و نان موتانت بطور سنتتیک تهیه گردید و از سیستم B.subtilis WB600/pWB980 جهت بیان ترشحی پپتیدهای آنتی باکتریال استفاده شد و فعالیت آنها ارزیابی گردید و مشاهده شد که در شرایط ایجاد شده، پپتید مهندسی شده در غلظت های 50-150 μg.ml قادر به کاهش رشد باکتری Desulfovibrio vulgaris می باشد.

Keywords:

بکتنسین مهندسی شده , خوردگی , بایوکنترل