بررسی عملکرد hsa-miR-133b و hsa-miR-125a-5p در مسیر تمایز سلول های بنیادی قلب انسان به کاردیومیوسیت

تمایز سلولهای بنیادی قلب انسان به کاردیومیوسیت در درمان بیماریهای قلبی بسیار حئز اهمیت است. در این راستا، توان سلولهای مولد قلبی (+)c-kit در ترمیم انفارکتوس قلبی تأئید شده است. همچنین مطالعات اخیر نشان داده اند که miRNA ها نقش مهمی در تمایز سلولهای بنیادی قلب ایفا می کنند. هدف: در این پژوهش، قصد داریم با بررسی بیان و عملکرد hsa-miR-133b و has-miR-125a-5p در مسیر تمایز سلولهای مولد قلبی (+)c-kit به کاردیومیوسیت، نقش آنها را در فعال سازی تمایز سلولهای بنیادی قلبی (+)c-kit به کاردیومیوسیت و ترمیم انفارکتوس قلبی مطالعه نمائیم. روش: تمایز بخشی از سلولهای مولد قلبی (+)c-kit به کاردیومیوسیت، تحت بررسی تیمارهای فارماکولوژی، توسط ICC برای تروپونین I و real time-PCR برای برخی فاکتورهای رونویسی قلبی مورد تأئید قرار گرفت. سپس سطح بیانی hsa-miR-133b و has-miR-125a-5p در مراحل تمایزی سلولهای (+)c-kit به کاردیومیوسیت بررسی شد. همچنین فهرست تمامی ژنهای هدف تأئید شده (تجربی) این دو miRNA از پایگاه اطلاعاتی miRWalk تهیه گردید و عملکرد ژن ه ای هدف هر miRNA به طور مجزا از طریق پایگاه اطلاعاتی GSEA مورد بررسی قرار گرفت. نتیجه: سطح بیان hsa-miR-133b در هفته نخست و در هفته سوم پس از نخستین تیمار با 5- azacytidin به ترتیب کاهش و افزایش یافت. (p<0.05). الگوی بیانی has-miR-125a-5p نیز شبیه پروفایل بیانی hsa-miR-133b در مراحل تمایزی بود. بررسی ژنهای هدف hsa-miR-133b در GSEA نشان داد که برخی از آنها در تکوین ماهیپه های مخطط و ترابری کاتیونهای مؤثر در ضربان قلب دخیل می باشند. همچنین سیزده ع دد از ژنهای هدف has-miR-125a-5p در مسیر ترارسانی علامت WNT وجود دارند. بسیاری از پروتئینهای WNTs از تنظیم کننده های کاردیوژنزیز می باشند از این رو احتمال می رود که کاهش بیان این miRNA ها با شروع تیمارهای فارماکولوژیکی (هفته نخست)، منجر به افزایش بیان ژنهای تحت تنظیم آنها و تمایز این سلولها به کاردیومیوسیت شود.

Keywords:

سلولهای بنیادی قلبی (+)c-kit , کاردیومیوسیت , hsa-miR-133b و has-miR-125a-5p