ایجاد و ارزیابی یک آنتی بادی ناحیه محافظت شده برای بررسی نقش گیرندهای کینازی غنی از لوسین

در ژنوم گیاهان صدها ژن شبه گیرنده کینازی (RLK) که نوع مل اکثر این ژنها مشخص نشده است وجود دارد. مطالعات نشان می دهد که این گیرنده ها نقش های مهمی از جمله در پاسخ به هورمونها، رشد و نمو، مقاومت به بیماری، خود ناسازگاری دارند. بنابر این توسعه روشها یا ابزارهایی برای تعیین عمل بسیاری دیگر از این ژنها ضروری است. در RLK ناحیه کینازی بسیار حفاظت شده ای وجود دارد و به زیرگروههایی تقسیم می شود. هدف تحقیق حاضرو ارزبابی یک آنتی بادی برای زیرخانواده غنی از لوسین (LRR) این گروه از گیرنده ها بمنظور مطالعه عملکرد آنها بوده است. در طراحی آنتی ژن برای تولید آنتی بادی توالی پروتئین های زیر گروه LRR دریافت و تطابق چندتایی در زیر ناحیه VIb انجام شد. غلاش پلاسمایی استخراج گردید. تأثیر سرم قبل و بعد از تزریق انتی ژن به خرگوش با فراکشن غشای پلاسمایی تأئید نمود که سرم حاوی آنتی بادی با فراکشن غشای پلاسمایی بیشترین فعالیت را دارد. نتیجه حاصل از وسترن بلات نشان داد که در ستون غشای پلاسمایی حداقل هفت باند پروتئینی با دامنه 35 تا 100 کیلو دالتون وجود دارد اما در فراکشن های غیر غشای پلاسمایی این باندها وجود نداشت. این تحقیق نشان داد که آنتی بادی عمومی ویژه یک ناحیه دارای پتانسیل برای بررسی بیان و یا عدم بیان LRR است و می توان از آن به عنوان ابزاری جهت بررسی تأثیر شرایط مختلف رشد از جمله تنش ها بر روی بیان پروتئین های مربوطه استفاده نمود.

Keywords:

غشای پلاسمایی , آنتی بادی , پروتئین , گیرنده کینازی