تولید آنتی بادی پلی کلونال مونواسپسیفیک جهت شناسایی باکتریهای جنس سالمونلا

هدف این پژوهش تولید آنتی بادی پلی کلونال مونواسپسیفیک جهت شناسایی اختصاصی باکتریهای جنس Salmonella بود. بدین منظور از سویه Salmonella Typhi به عنوان آنتیژن استفاده شد. باکتریها پس از کشت، با استفاده از فرمالدهید ۸ در هزار غیر فعال گردیدند سپس سوسپانسیون باکتریایی با تراکم ۱۰ در هر میلیلیتر تهیه شد و به چهار راس خرگوش نر ۳ تا ۵ ماهه در دوزهای ۰٫۵، ۱، ۲ و ۳ میلیلیتر در فواصل چهارروزه تزریق گردید. یک هفته پس از آخرین تزریق از قلب حیوانات خونگیری و سپس دوز یادآور به میزان ۳ میلیلیتر تزریق شد. آنتی بادیهای استخراج شده از سرم حیوانات از نظر واکنشهای متقاطع بررسی و آنتی بادیهای غیر اختصاصی حذف شدند. تیتر نهایی آنتی بادی علیه Salmonella Typhi برابر ۱۹۰۰ تعیین شد مراحل خالص سازی شامل رسوب با سولفات آمونیوم، دیالیز کروماتوگرافی میل ترکیبی ژل فیلتراسیون و اولترافیلتراسیون بود. آنتی بادی نهایی میتواند برای شناسایی اختصاصی باکتریهای جنس Salmonella در روشهای تشخیصی مورد استفاده قرار گیرد.

Keywords:

آنتی بادی پلی , کلونال , سالمونلا تیفی , خالص سازی , پروتئین ایمن سازی , حیوانی , کروماتوگرافی میل ترکیبی