راهبرد جدید خوراکدهی برای افزایش تولید اینترفرون گامای انسانی در کشت غیر مداوم همراه با خوراکدهی اشریشاکلی نوترکیب

در فرایند غیر مداوم با خوراک دهی، روش خوراکدهی بدلیل تاثیر زیادی که روی شرایط محیطی و تغذیه ای موثر در رشد میکروارگانیسم و بالطبع تولید پروتئین نوترکیب دارد همواره بعنوان رویکرد اساسی در افزایش تولید پروتئین های نوترکیب مورد توجه قرا ردارد. در این تحقیق روش خوراکدهی با سرعت رشد ویژه حداکثر و بدون کنترل پس خور برای رسیدن به بالاترین تراکم سلولی و تولید اینترفرون گامای انسانی از اشریشاکلی نوترکیب سویه BL21(DE3) [pTE3a-hifny] بررسی شد و مناسبترین راهبرد خوراکدهی برای رسیدن به بالاترین بهر دهی کلی تولید توده زیستی و بالطبع تولید بالای پروتئین نوترکیب مورد نظر بدست آمد. با راهبرد خوراک دهی جدید دانسیته سلولی نهایی 5 مثبت ومنفی 130 (گرم وزن خشک سلول بر لیتر) و با غلظت اینترفرون گاما 1 مثبت ومنفی54 (گرم اینترفرون گاما بر لیتر) در مدت 0/5 مثبت ومنفی 16 ساعت و بازدهی ویژه تولید توده زیستی 0/1 مثبت ومنفی0/44 (وزن خشک سلول بر گرم گلوکز) و بازدهی ویژه تولید اینترفرون گاما 10 مثبت ومنفی400 (میلی گرم پروتئین بر گرم توده سلولی) و بهره دهی کلی تولید بیومس 0/3 مثبت ومنفی9/1 (گرم بر ساعت بر لیتر) و بهره دهی کلی تولید اینترفرون گاما 0/1 مثبت ومنفی3/35 (گرم بر ساعت بر لیتر) بدست آمد، که این بالاترین مقدار بهره دهی تولید دانسیته سلولی و پروتئین نوترکیب از اشرشیاکلی است که تاکنون گزارش شده است. که برای اینترفرون گاما بهره دهی کلی تولید بیومس و بهره دهی کلی تولیداینترفرون گاما به ترتیب 3/7 و 3/5 برابر بالاتر از مقدارگزارش شده است. ضمنا تاثیر روش خوراکدهی روی دانسیته سلول نهایی، غلظت استات (بعنوان اصلی ترین متابولیت جانبی)، فسفات، آمونیوم ، گلوکز محیط تخمیر، پایداری پلاسمید ، مقدار گلوکز و امونیاک مصرفی در کشت غیر مداوم همراه با خوراک دهی باکتری اشریشاکلی نو ترکیب سویه BL21(DE3) حاوی ژن اینترفرون گامای انسانی بررسی شد.

Keywords:

راهبرد خوراکدهی , کشت غیر مداوم همراه با خوراکدهی , اشریشیاکلی نوترکیب , اینترفرون گامای انسانی