اسفندیار جلیل زاده - دکترای تخصصی پزشکی اجتماعی و پیشگیری از بیماریهای عفونی، مدیر امور آزمایشگاه مرجع شرکت آب و فاضلاب استان تهران
طیبه جلیلی - فوق لیسانس میکروبیولوژی، معاون امور آزمایشگاه مرجع شرکت آب و فاضلاب استان تهران، ایمیل

مقدمه و اهمیت موضوع: وجود کلیفرمها به عنوان شاخص کیفیت میکروبی آب آشامیدنی میتواند بیانگر حضور عوامل بیماریزای خطرناک در آب باشد . آلودگیهای میکروبی در آب سلامت جامعه را به خطر می اندازد و باید بطور سریع و دقیق شناسایی گردد. با توجه به اینکه متد های روتین از نظر سرعت و دقت دارای محدودیت می باشد، بنابراین در این تحقیق جهت تشخیص سریع و دقیق کلیفرمها در آب از سوبسترا های فلوروژنیکMUG و X-GAL موجود در Readycult استفاده شد و با روش PA-test مقایسه گردید.مواد و روشها: ابتدا 360 نمونه در طی یکسال از آب ورودی تصفیه خانه جلالیه بصورت استاندارد تهیه شد. پس از انتقال نمونه ها به آزمایشگاه، تشخیص باکتریهای توتال کلیفرم(TC) و کلیفرم گرماپایE.coli با استفاده از محیط کشت فلوروژنیک Readycult و محیط کشت PAbroth انجام شد . نمونه هایRC در زیرUV با طول موجnm366 مشاهده گردید و آزمایش اندول نیز انجام شد. همچنین از نمونه های مثبت PA براث در BGLB و ECbroth تلقیح گردید. نتایج و بحث: نتایج نشان داد که تعداد نمونه های مثبت دارای TC و E.Coli در روش آنزیمیRC)) و استفاده از سوبستراهای فلوروژنیک ( به ترتیب 21 و 5 ) بیشتر از روش PA-test ( به ترتیب 17و4 ) بود ) (P>0/05 . تعداد نمونه های مثبت کاذب دارای باکتریهای مذکور در روش آنزیمی ( به ترتیب 1 و0 ) کمتر از روش test PA ( به ترتیب 2 و 2) بود، که نشان میدهد در محیط RC رشد Aeromonas hydrophila که غالبا باعث ایجاد نتایج مثبت کاذب می گردد ، بیشتر مهار میشود. مدت زمان مورد نیاز جهت تشخیص باکتریهای کلیفرم در روش آنزیمی RC(18-24 ساعت) کمتر از روش PA-test(48-72 ساعت ) بود. سوبستراهای فلوروژنیک MUG و کروموژنیک X-GALتوانستند با واکنش دادن با آنزیم های بتا-D– گالاکتوزیداز و بتا-D- گلوکورونیداز که برای باکتریهای TC وE.coli اختصاصی هستند، ابزار مفیدی در تشخیص کلیفرمها باشند .نتیجه گیری: استفاده از سوبستراهای فلوروژنیک موجود در Readycult، متد آنزیمی مورد تاییدEPA، منجر به تشخیص سریع و همزمان توتال کلیفرم و E.coli در یک آنالیز شد . در این روش تعداد بیشتری از کلیفرمها حتی انواع استرس دیده در اثر کلر و باکتریها ی زنده ولی غیر قابل کشت ( VBNC ) تشخیص داده شدند. این روش آنزیمی در مقایسه با روشهای متداول به دلیل کاهش زمان، مواد و تجهیزات آزمایشگاهی، نیروی انسانی مورد نیاز و همچنین افزایش دقت وسرعت جهت تشخیص آلودگیهای کلیفرمی درآب بسیار با ارزش مفید میباشد.

باکتریها ی کلیفرم ، E.coli ، آب شرب، سوبسترای فلوروژنیک ، تشخیص سریع آنزیمی