جداسازی لایه های اپیدرم و درمپوست از هم با استفاده از آنزیم اکتینیدین میوه ی کیوی به جای آنزیم های معمول جداسازی

آنزیم های پروتئولیتیک، خصوصا ترمولایزین و دیسپاز برای هضم ماتریکس خارج سلولی و کلاژن های بین دو لایه ی اپیدرم و درم مورد استفاده قرار می گیرند. ترمولایزین و دیسپاز هم که هر دو در جداسازی اپیدرم و درم از هم به کار می روند به سختی از منابع باکتریایی یا جانوری بدست می آیند. یافتن پروتئاز جایگزین ترمولایزین و دیسپاز در منابع گیاهی که راحت تر و با هزینه ی کمتر تخلیص و آماده ی استفاده شود، از اهمیت ویژه ای برخوردار است. در این مطالعه که به صورت مشترک بین دانشگاه رازی و مرکز تحقیقات بیولوژی پزشکی در سال 1389 انجام شد از آنزیم اکتینیدین که به وفور در میوه ی کیوی یافت می شود و در واقع عمده ترین پروتئین کیوی است ، برای جداسازی اپیدرم از درم استفاده کردیم. برای خالص سازی اکتینیدین از چند مرحله سانتریفوژ و به دنبال آن اوالترافیلتراسیون و نهایتا ستون کرماتوگرافی تعویض یونی استفاده شد.بعد از انجام خالص سازی به منظور بررسی خلوص نمونه از الکتروفورز SDS-PAGE استفاده شد.اکتینیدین خاص شده در غلظت های مختلف برای جداسازی اپیدرم از درم در دمای 4 درجه و در زمان های مختلف در مقایسه با غلظت و زمان معمول ترمولایزین استفاده شد. جداسازی در بسیاری از غلظت ها با اکتینیدین با موفقیت انجام شد، غلظت و زمان بهینه در مقایسه با آنزیم ترمولایزین اشاره شده تعیین گردید.

Keywords:

اپیدرم , اکتینیدین , ترمولایزین , درم