مصطفی مطلبی - تهران، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری
محمدرضا زمانی، - تهران، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری
زهرا مقدسی جهرمی - تهران، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری
محبوبه ضیائی، - تهران، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری

کلزا به عنوان یکی از محصولات مهم زراعی، نسبت به بسیاری از قارچهای بیماریزا حساس میباشد. یکی از روشهای ممانعت از نفوذ قارچهای بیماریزا به درون گیاهان، استفاده از آنزیمهای هیدرولازی نظیر کیتینازها است که باعث تجزیه کیتین موجود در دیواره این قارچها میگردد. در این تحقیق جهت ایجاد مقاومت به قارچ Alternaria solani در گیاه کلزا، ژن کیتیناز 42 حاوی دمین متصل شونده به کیتین (کایمر 42 ) جدا شده از قارچ ، Trichoderma atroviride، به این گیاه منتقل گردیده و میزان مقاومت آن مورد بررسی قرار گرفته است. بدین منظور ابتدا حضور ژن کایمر 42 در سازه بیانی pBI121 تحت کنترل پروموتر CaMV 35S و ترمیناتور نوپالین سینتاز (NOS) با استفاده از الگوی PCR و هضم آنزیمی مورد تأیید قرار گرفت. جهت انتقال ژن کلون شده از tumefaciens Agrobacterium سویه LBA4404 و ریزنمونه های کوتیلدونی استفاده گردید. جهت تأیید گیاهان تراریخت از الگوی PCR با استفاده از آغازگرهای اختصاصی ژن استفاده شد. ارزیابی مقاومت گیاهان تراریخت در برابر قارچ Alternaria solani به روش انتشار دیسک و میزان رشد اسپورهای قارچ انجام گرفت. آنالیز نتایج بهدست آمده نشان داد که گیاهان تراریخت، نسبت به گیاه شاهد (کلزای غیر تراریخت) در برابر قارچ A. solani از مقاومت بیشتری برخوردار میباشند.

کلزا، کایمر کیتیناز 42 ، انتقال ژن، Alternaria solani